[发明专利]一种(2S,5R)-苄氧胺基哌啶-2-甲酸乙酯草酸盐的检测方法

权利要求书

1.一种(2S,5R)-苄氧胺基哌啶-2-甲酸乙酯草酸盐的检测方法，其特征在于：所述的检测方法为液相检测法，具体包括如下步骤：

(1)稀释液的配制：水；

(2)系统适应性溶液的配制：取适量的(2S,5R)-苄氧胺基哌啶-2-甲酸乙酯草酸盐，适量的水解杂质A，适量的非对应异构体置于同一容量瓶中，用稀释液溶解定容，作为系统适应性试验溶液；其中，所述水解杂质A为(2S,5R)-苄氧胺基哌啶-2-甲酸；

(3)供试品溶液的配制：取供试品适量，精密称定，加稀释液稀释制成每1ml含0.5mg-1mg的溶液，作为供试品溶液；

(4)空白试验：精密量取稀释液，注入液相色谱仪，记录色谱图；

(5)系统适应性试验：精密量取系统适应性试验溶液，注入液相色谱仪，记录色谱图；

(6)供试品试验：精密量取供试品溶液，注入液相色谱仪，记录色谱图；

(7)高效液相色谱条件：

色谱柱：Phenomenex Luna 5u C18(2)100A，4.6*250mm,5μm

流动相：流动相A:TFA水溶液；流动相B:乙腈

检测器：紫外检测器

定量方法：面积归一化法；

所述流动相按梯度洗脱，具体如下：

0分钟，流动相A为80％，流动相B为20％；

5分钟，流动相A为80％，流动相B为20％；

25分钟，流动相A为20％，流动相B为80％；

30分钟，流动相A为80％，流动相B为20％；

40分钟，流动相A为80％，流动相B为20％。

2.根据权利要求1所述的一种(2S,5R)-苄氧胺基哌啶-2-甲酸乙酯草酸盐检测方法，其特征在于：所述流动相A：TFA水溶液的浓度为0.05％。

3.根据权利要求1所述的一种(2S,5R)-苄氧胺基哌啶-2-甲酸乙酯草酸盐的检测方法，其特征在于：所述流动相的流速为1mL/min，进样量为20μL。

4.根据权利要求1所述的一种(2S,5R)-苄氧胺基哌啶-2-甲酸乙酯草酸盐的检测方法，其特征在于：所述紫外检测器的检测波长为210nm。

5.根据权利要求1所述的一种(2S,5R)-苄氧胺基哌啶-2-甲酸乙酯草酸盐的检测方法，其特征在于：所述色谱柱的温度为常温。

6.根据权利要求1所述的一种(2S,5R)-苄氧胺基哌啶-2-甲酸乙酯草酸盐的检测方法，其特征在于：所述系统适应性试验中理论板数按(2S,5R)-苄氧胺基哌啶-2-甲酸乙酯草酸盐计算应不低于5000，主峰与任意杂质峰之间的分离度应不小于1.5。

7.根据权利要求1所述的一种(2S,5R)-苄氧胺基哌啶-2-甲酸乙酯草酸盐的检测方法，其特征在于：供试品试验的结果色谱图中的色谱峰须扣除空白试验的色谱峰，再按面积归一法计算。