[发明专利]一种同时检测四种外来和新发动物疫病的液相蛋白芯片试剂盒及其制备方法

权利要求书

1.一种同时检测四种外来和新发动物疫病的液相蛋白芯片试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括四种具有不同编码的、直径为6.5μm的羧基活化的荧光磁性微球；且上述四种荧光磁性微球分别偶联了抗原小反刍兽疫病毒核蛋白(PPRV-N)、抗原水泡性口炎病毒核蛋白(VSV-N)、抗原施马伦贝格病毒核蛋白(SBV-N)和抗原蓝舌病病毒核蛋白(BTV-VP7)。

2.根据权利要求1所述的液相蛋白芯片试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括用于和待检样品、质控品和阴性血清作用的生物素标记的驴抗羊二抗。

3.根据权利要求1所述的液相蛋白芯片试剂盒，其特征在于，还包括链亲和霉素-藻红素。

4.根据权利要求1所述的液相蛋白芯片试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括质控品和标准品，所述质控品包括针对PPRV抗原的羊多抗及其阴性血清、针对VSV抗原的羊多抗及其阴性血清、针对SBV抗原的羊多抗及其阴性血清和针对BTV抗原的羊多抗及其阴性血清；所述标准品包括PPRV-N单抗、VSV-N单抗、SBV-N单抗和BTV-VP7单抗。

5.如权利要求1所述的液相蛋白芯片试剂盒的制备方法，包括以下步骤：

(1)取四种具有不同编码的、直径为6.5μm的荧光微球各100μL，依次加入EDC和S-NHS对微球表面的羧基进行活化以备偶联；

(2)将小反刍兽疫病毒核蛋白(PPRV-N)、水泡性口炎病毒核蛋白(VSV-N)、施马伦贝格病毒核蛋白(SBV-N)和蓝舌病病毒核蛋白(BTV-VP7)分别与步骤(1)中的活化微球偶联，制备相应四种捕获微球并用血球计数器分别计数；

(3)验证步骤(2)中蛋白的偶联效率。

6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，步骤(3)的蛋白的偶联效率验证方法为，分别将PPRV、VSV、SBV、BTV四种抗体生物素化，再加入SA-PE读取荧光值。