[发明专利]一种靶向基因UBE2J2的修饰siRNA及其应用

说明书

本发明属于基因治疗领域，具体涉及一种靶向基因UBE2J2的修饰siRNA及其应用。该修饰siRNA由正义链和反义链组成；所述正义链的序列如SEQ ID NO：1所示，所述反义链的序列如SEQ ID NO：2所示，其中，序列中U均为2’‑Fluoro‑dU修饰。经过构建的两个动物模型测试证明，本发明的UBE2J2 siRNA能显著抑制肝癌生长与肝癌转移，可作为肝癌靶向治疗的新靶标，具有潜在的临床应用前景。

技术领域

本发明属于基因治疗领域，更具体地，涉及一种靶向基因UBE2J2的修饰siRNA及其应用。

背景技术

肝癌是人类最常见的恶性肿瘤之一，我国是肝癌大国，我国的肝癌患者占了全世界一半以上。肝癌也是致死率最高的癌症之一，平均五年生存率只有5％。目前手术治疗与肝脏移植仍然是肝癌治疗的首选方案。但很多患者往往确诊的时候已经处于晚期，无法采用手术治疗。

肿瘤转移是造成大于90％癌症患者死亡的主要原因。由于肝癌细胞恶性度高，癌组织生长迅速，加上肝脏的双血管供应特点，肝脏内血液丰富，所以肝癌细胞很容易通过血流转移到肝内其他部位而发生肝癌转移。

基因靶向治疗是目前癌症治疗的前沿技术。通过对与肝癌相关基因表达的干扰，从而抑制肝癌发生与肝癌转移，对提高我国肝癌精准治疗水平，具有重要意义。

发明内容

本发明的目的是提供一种靶向基因UBE2J2(SEQ ID NO：5所示)的修饰siRNA及其应用。本发明通过设计合成UBE2J2的siRNA并加以化学修饰(命名为UBE2J2Stable^TMsiRNA)，用肝癌荷瘤小鼠与肝癌转移小鼠动物模型进行验证，确定UBE2J2Stable^TM siRNA具有抑制肝癌生长、抑制肝癌转移的作用，为肝癌治疗提供新的靶标和新的思路。

本发明的第一方面提供一种靶向基因UBE2J2的修饰siRNA，该修饰siRNA由正义链和反义链组成；所述正义链的序列如SEQ ID NO：1所示，所述反义链的序列如SEQ ID NO：2所示，

5’-CCAGAGAAUUUCCUUUCAATT-3’(SEQ ID NO：1)

5’-UUGAAAGGAAAUUCUCUGGTT-3’(SEQ ID NO：2)

其中，序列中U均为2’-Fluoro-dU修饰。Fluoro-dU修饰进一步提高了siRNA的稳定性。

本发明的第二方面提供所述的靶向基因UBE2J2的修饰siRNA在制备治疗肝癌的药物中的应用。

其中，所述治疗肝癌包括抑制肝癌细胞增殖和/或抑制肝癌细胞转移。所述肝癌细胞包括但不限于HCCLM3肝癌细胞。

经过构建的两个动物模型测试证明，本发明的UBE2J2siRNA能显著抑制肝癌生长与肝癌转移，可作为肝癌靶向治疗的新靶标，具有潜在的临床应用前景。

本发明的其它特征和优点将在随后具体实施方式部分予以详细说明。

附图说明

通过结合附图对本发明示例性实施方式进行更详细的描述。

图1-2示出了western blot分析UBE2J2Stable^TM siRNA对UBE2J2的长效抑制作用。

图3-6示出了荷瘤实验验证UBE2J2Stable^TM siRNA具有抑制肝癌生长、抑制CD34与AFP表达的活性。

图7-8示出了细胞克隆形成实验验证UBE2J2Stable^TM siRNA具有抑制肝癌细胞侵袭扩散的活性。