[发明专利]一种肝癌生物学过程中转录组和蛋白组学的ELISA方法在审
申请号: | 201711169087.5 | 申请日: | 2017-11-22 |
公开(公告)号: | CN107942055A | 公开(公告)日: | 2018-04-20 |
发明(设计)人: | 于思创;王海云 | 申请(专利权)人: | 南宁科城汇信息科技有限公司 |
主分类号: | G01N33/574 | 分类号: | G01N33/574 |
代理公司: | 南宁指北针知识产权代理事务所(特殊普通合伙)45120 | 代理人: | 于勤,林培 |
地址: | 530022 广西壮族自治区南*** | 国省代码: | 广西;45 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 肝癌 生物学 过程 转录 蛋白组 elisa 方法 | ||
1.一种肝癌生物学过程中转录组和蛋白组学的ELISA方法,其特征在于:由以下步骤组成:
①用包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1~10μg/ml;
②在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml,4℃过夜;
③次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次,每次3分钟;
④加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时后洗涤(注意留出空白孔、阴性对照孔和阳性对照孔);
⑤于各反应孔中,加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.1ml;
⑥37℃孵育0.5~1小时,洗涤;
⑦于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分钟;
⑧于各反应孔中加入终止液0.05ml;
⑨结果判定:在ELISA检测仪上,于450nm处,以空白对照孔调零后测各孔OD值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。
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