[发明专利]一种提取菌胶团胞外聚合物的方法

权利要求书

1.一种胞外聚合物提取液，由下列组分组成：按重量比为，二氧化钛5-6份、3.6%的甲醛溶液5-6份、pH为5.5的乙酸-乙酸钾溶液10-15份、75目石英砂20-25份。

2.如权利要求1所述的胞外聚合物提取液的使用方法，污泥中添加胞外聚合物提取液的量为：40-52g/L污泥。

3.一种高效提取菌胶团胞外聚合物的方法，采用以下步骤：

（1）清洗

原位获取污泥样品，测定其体积，将滤纸润湿后覆盖于布氏漏斗上，将污泥放置在滤纸上，打开抽滤机，在漏斗内加入氯化钠溶液对污泥进行清洗，直到漏下的溶液变澄清；

（2）离心法提取黏液层

处理后的污泥加入氯化钠溶液恢复原体积，分装入离心管内，在低转速的离心机内离心，提取上清液为黏液层；所述离心机的离心速度为550-650r/min，离心时间为10-15min，离心温度为28℃；

（3）高速离心法提取松散结合性胞外聚合物（LB-EPS）

使用氯化钠溶液将离心管污泥恢复至原体积；使用120W超声将污泥处理1.5-2min；使用高速离心机内在低温、高速的条件下离心，提取上清液为松散结合型胞外聚合物（LB-EPS）；离心机的温度为3-5℃，离心速度为5000-6000r/min，离心时间为8-10min；

（4）甲醛—乙酸—乙酸钾加热法提取紧密结合型胞外聚合物（TB-EPS）

将步骤（3）中获得的污泥全部加入烧杯中，加入氯化钠溶液恢复至原体积；加入提取液，将污泥放入震荡培养箱内以25-27℃、150-200r/min震荡培养15-20min，取出；所述提取液为：二氧化钛5-6g/L污泥、3.6%的甲醛溶液5-6mL/L污泥、pH为5.5的乙酸-乙酸钾溶液10-15mL/L污泥、75目石英砂20-25g/L污泥；

（5）将烧杯内污泥水浴加热20min，冷却后分装于离心管内，在1-4℃的条件下低温高速离心20-22min；提取上清液为（TB-EPS）；离心机转速为8000-9000r/min，离心时长为18-20min；

（6）将提取的黏液层、LB-EPS与TB-EPS合并混匀，使用滤膜过滤，即为胞外聚合物提取液；提取液应在1-4℃条件下冷藏保存。

4.如权利要求3所述的高效提取菌胶团胞外聚合物的方法，其特征在于，步骤（4）中，pH为5.5的乙酸-乙酸钾溶液的配制方法为：将41g乙酸钾与29.5mL冰乙酸分别定容至500mL，将乙酸钾溶液与乙酸溶液按照9:1的体积比混匀，密封保存，即为pH=5.5的乙酸钾溶液。

5.如权利要求3所述的高效提取菌胶团胞外聚合物的方法，其特征在于，步骤（1）所述的氯化钠溶液浓度为0.50%-0.80%；抽滤机的压力为0.03-0.04MPa；步骤（3）、（4）中所述的氯化钠溶液浓度为0.05%-0.10%。

6.如权利要求3所述的高效提取菌胶团胞外聚合物的方法，其特征在于，步骤（5）中的水浴加热温度为60-70℃。

7.如权利要求3所述的高效提取菌胶团胞外聚合物的方法，其特征在于，步骤（6）中过滤使用0.40-0.45μm水系滤膜加压过滤。