[发明专利]一种豆制品中6组偶氮磺酸色素同分异构体的同时检测方法

说明书

本发明公开了一种豆制品中6组偶氮磺酸色素同分异构体的同时检测方法，所述方法为：(1)将样品提取后，采用固相萃取净化，得到上样液；(2)用液相色谱‑串联质谱对步骤(1)得到的上样液进行测定，并和标准溶液进行比对分析获得定性定量结果。本发明所述检测方法，是通过研究上述偶氮磺酸色素同分异构体的质谱和色谱性质差异，开发了能特定区分、分离和定量测定上述色素同分异构体的分析方法，弥补了目前偶氮磺酸色素检测方法难以准确测定同分异构体的不足；再结合适当的前处理净化过程，分析时间短，灵敏度高，可作为该类偶氮磺酸色素同分异构体的确证分析方法。

技术领域

本发明涉及一种偶氮磺酸色素同分异构体的液相色谱-串联质谱检测方法，特别涉及豆制品中6组偶氮磺酸色素同分异构体的同时检测方法。

背景技术

在食品工业中，人们常加入偶氮磺酸色素以加强食品的色泽，改善食品的感官品质，促进人的食欲。但偶氮磺酸色素多为含有苯环或萘环结构的化合物，长期摄入可能会致畸、致癌、致突变。早在2008年12月，卫生部发布了《食品中可能违法添加的非食用物质和易滥用的食品添加剂品种名单(第一批)》，将酸性橙II列入了非食用物质名单；根据现行的《食品添加剂使用标准(GB 2760-2014)》，我国仅允许使用日落黄、胭脂红等7种偶氮磺酸色素。

目前，对偶氮磺酸色素的检测主要采用液相色谱法或液相色谱-串联质谱法。但偶氮磺酸色素中存在部分同分异构化合物，它们主要表现为磺酸基团位置的差异，其色谱、质谱行为相似，在日常的检测中较难区分。若不加以区分，容易在定性和定量上出现偏差，给检测结果的判定造成困难。

发明内容

为了克服现有技术的不足，本发明目的是提供一种豆制品中6组偶氮磺酸色素同分异构体的同时检测方法，作为偶氮磺酸色素检测方法的补充，提高了检测的准确性。

为了达到上述目的，本发明采用以下技术方案：

一种豆制品中6组偶氮磺酸色素同分异构体的同时检测方法，所述方法包括如下步骤：

(1)将样品提取后，进行固相萃取净化，得到上样液；

(2)用液相色谱-串联质谱对步骤(1)得到的上样液进行测定，并和标准溶液的测定结果进行比对分析。

进一步地，所述6组偶氮磺酸色素同分异构体包括：苋菜红和胭脂红，日落黄和酸性橙10，酸性红13、酸性红14、酸性红44和酸性红17，酸性橙20、酸性橙II和藏花橙G，橙黄IV和酸性黄36，酸性红9和酸性红88中的一组或多组。

进一步地，所述豆制品中6组偶氮磺酸色素同分异构体的同时检测方法，步骤(1)包括如下步骤：

a提取：

准确称取2g豆制品，加入5mL提取液，混合均匀，离心，回收上清液；重复提取一次，合并上清液后，氮吹至近干，用5mmol/L乙酸铵溶液复溶并定容至5mL；

b固相萃取净化：

固相萃取柱依次用5mL甲醇、5mL水活化后，准确量取2.5mL复溶液进入固相萃取柱，流速控制在1～2滴/秒；用5mL淋洗液淋洗后，用5mL洗脱液洗脱，收集洗脱液并氮吹至干，加入1mL定容液定容，过0.22μm滤膜，得到上样液。

作为优选，所述步骤a中的提取液为氨水、甲醇和水的混合物，所述提取液中氨水、甲醇和水的体积比为5:(20～80):(15～75)。

作为优选，所述步骤b中的固相萃取柱为菲罗门X-AW弱阴离子固相萃取柱。

作为优选，所述步骤b中的淋洗液为5mmol/L乙酸铵溶液。

作为优选，所述步骤b中的洗脱液为氨水和甲醇的混合溶液，混合体积比例为10:90。