[发明专利]一种与野生二粒小麦抗白粉病基因紧密连锁的分子标记及其应用

权利要求书

1.一种与野生二粒小麦抗白粉病基因紧密连锁的分子标记，其特征在于：所述分子标记与以色列引进野生二粒小麦ES4中抗白粉病基因紧密连锁，所述分子标记是显性SSR标记sdau714，用于扩增所述的分子标记的引物如下：

sdau714-F：5’-tcatcggcacattgggtag-3’ ，其核苷酸序列如SEQ ID No.1所示；

sdau714-R：5’-cagacactccttgacggttt-3’ ，其核苷酸序列如SEQ ID No.2所示。

2.根据权利要求1所述的一种与野生二粒小麦抗白粉病基因紧密连锁的分子标记，其特征在于：利用所述的分子标记引物sdau714进行PCR扩增，在抗病材料ES4中扩增出一条807bp的特异片段。

3.根据权利要求1所述的一种与野生二粒小麦抗白粉病基因紧密连锁的分子标记，其特征在于： 所述的分子标记sdau714，与野生二粒小麦ES4中抗白粉病基因的遗传距离为0.1cM。

4.根据权利要求1所述的一种与野生二粒小麦抗白粉病基因紧密连锁的分子标记，其特征在于： 所述分子标记sdau714用于鉴定野生二粒小麦ES4中抗白粉病基因的步骤如下：

1）以野生二粒小麦ES基因组DNA为PCR模板，以SSR标记sdau714为引物，进行PCR扩增，反应体系为10μl，所述反应体系包括：80-120ng/μl野生二粒小麦基因组DNA，2×Taq MasterMix，无菌水定容至10μl；

2）PCR扩增程序为：95℃预变性5min；94℃变性30s，65℃退火30s，72℃延伸1min，以后每个循环依次降低1℃，直到53℃，共12个循环；94℃变性30s，56℃退火30s，72℃延伸1min，26个循环；72℃延伸10min，10℃保存备用；

3）电泳为1%的琼脂糖凝胶，将10μl PCR产物和3μl上样缓冲液混合后点样，120V电压下电泳30min，溴化乙锭染色后拍照；

4）分析鉴定，能扩增出807bp特异性条带，则说明小麦种质中存在抗白粉病基因，否则，待测小麦种质中不存在野生二粒小麦抗白粉病基因。

5.根据权利要求1所述的一种与野生二粒小麦抗白粉病基因紧密连锁的分子标记，其特征在于：野生二粒小麦ES4抗白粉病基因连锁的分子标记在辅助选择育种中的应用。

6.根据权利要求1所述的一种与野生二粒小麦抗白粉病基因紧密连锁的分子标记，其特征在于：所述抗白粉病基因来源于以色列野生二粒小麦，位于4A染色体的长臂末端。