[发明专利]一种低分子果胶的制备方法

说明书

本发明公开了一种低分子果胶的制备方法，旨在提供一种操作简单、分子量分布单一、易于工业化生产的低分子果胶的制备方法；其技术要点是：(1)果胶溶于去离子水中形成溶液；(2)果胶溶液进行微滤膜过滤；(3)果胶溶液中加入HCl溶液形成酸凝胶，快速搅拌将凝胶打碎，并进行搅拌清洗，加入NaOH溶液溶解凝胶形成浓溶液；(4)纯化后的果胶溶液进行酸水解水解结束后减压抽滤去除水分，加入碱溶液溶解凝胶形成溶液；(5)水解后的果胶溶液中加入果胶酶进行降解，酶解结束后果胶溶液经减圧蒸留去除水分形成浓溶液；(6)果胶溶液加入无水乙醇进行沉淀；(7)果胶沉淀进行常压干燥。

技术领域

本技术涉及生物制药领域，具体涉及一种低分子果胶的制备方法。

背景技术

果胶是人体第七大营养素膳食纤维的主要成分，具有多种食用和药用价值。但是由于果胶分子量较大、并且难溶不能有效添加到保健食品中，而低分子果胶(MCP)由于水溶性好、容易被肠道吸收而进入血液循环，因此在保健食品、医药等领域的应用更加广泛。低分子果胶具有多种生物活性，可以降低血液中的胆固醇浓度、抑制肝脏中油脂的积累及提高机体免疫力等，它还可以与血液中的重金属结合进而促使其排出体外。由于具有丰富的半乳糖单体，所以低分子果胶具有抑制肿瘤的功能，对所有具有半乳糖凝集素-3的肿瘤均有作用，且其有效率与半乳糖凝集素-3的表达成正比。据文献报道，MCP对常见的19种肿瘤都有效这些肿瘤包括：前列腺癌、肾癌、卡波济氏肉瘤、慢性白血病、乳腺癌、肉瘤、卵巢癌、结直肠癌、咽喉癌、淋巴瘤,黑色素瘤、小肠肿瘤、膀胱肿瘤、肺癌、支气管癌、咽部鳞状细胞癌、肠癌、胃癌、皮肤癌、肝癌、脑癌、胶质纤维瘤、甲状腺癌和骨髓癌等。由于低分子果胶具有多种生物活性，可以开发成保健食品，在肿瘤预防与治疗、心血管疾病防治与治疗、抗菌消炎、抗氧化、抗自由基、调节免疫、降血脂等方面具有巨大的应用前景。

目前商品化果胶是从植物中提取生产，直接提取的果胶分子量在5-30万之间，因此低分子果胶只能从果胶降解获得。酶法降解是常用的生产果胶方法，但是其只能断裂果胶分子主链不能去除果胶分子的支链，因此本发明采用酸水解与酶水解结合的方法降解果胶生产低分子果胶，旨在提供一种操作简单、分子量分布单一、易于工业化生产的低分子果胶制备方法。

发明内容

本发明的目的是开发一种操作简单、分子量分布单一、易于工业化生产的果胶纯化方法。

一种低分子果胶的制备方法，其特征在于，依次包括如下步骤：

(1)果胶溶解

称取一定量的苹果果胶在搅拌条件下加入到去离子水中溶解，果胶质量浓度为0.5-4％，搅拌转速为500-1500rpm，温度为20-80℃，搅拌时间1-4h。

(2)果胶溶液微滤

果胶完全溶解后依次进行孔径为0.8、0.45和0.22μm的微滤膜过滤，过滤温度为20-80℃，溶液pH值为2.5-9。

(3)凝胶清洗

过滤后的果胶溶液中加入酸溶液调节pH至1-2形成酸凝胶，快速搅拌将凝胶打碎，搅拌清洗时间为1-4h，温度为20-60℃，清洗次数为1-4次。清洗结束后减压抽滤去除70-90％体积的水分，加入碱溶液调pH至6-7溶解凝胶形成浓溶液。

(4)果胶水解

纯化后的果胶溶液加入酸溶液调节pH至1-2形成酸凝胶，加热进行酸水解，水解温度为70-90℃，水解时间为1-6h，搅拌转速为500-1500rpm。水解结束后减压抽滤去除70％-90％体积的水分，加入碱溶液调pH至6-7溶解凝胶形成溶液。

(5)果胶酶解