[发明专利]一种检测复方三维右旋泛酸钙糖浆4种B族维生素的方法

权利要求书

1.一种检测复方三维右旋泛酸钙糖浆4种B族维生素的方法，其特征在于：以乙腈为流动相A相，以含十二烷基硫酸钠的甲酸水溶液为流动相B相；取待测溶液进行HPLC检测后，根据色谱图对维生素B₁、维生素B₂、维生素B₆、烟酰胺4种维生素进行定性和/或定量分析；

所述HPLC检测过程中采用梯度洗脱，洗脱程序为：

0～5min，流动相A相的体积分数为10％；

5～20min，流动相A相的体积分数由10％升至20％；

20～30min，流动相A相的体积分数由20％升至35％；

30～40min，流动相A相的体积分数由35％升至45％；

40～50min，流动相A相的体积分数由45％升至60％；

50～60min，流动相A相的体积分数由60％升至75％；

60～65min，流动相A相的体积分数为75％；

65～70min，流动相A相的体积分数由75％降至10％；

70～80min，流动相A相的体积分数为10％；

所述流动相B相中，甲酸的体积分数为0.05％。

2.根据权利要求1所述的检测复方三维右旋泛酸钙糖浆4种B族维生素的方法，其特征在于：所述HPLC检测过程中，采用的流速为0.8～1.0mL·min^-1。

3.根据权利要求1所述的检测复方三维右旋泛酸钙糖浆4种B族维生素的方法，其特征在于：所述HPLC检测过程中，采用的色谱柱柱温为25～35℃。

4.根据权利要求1所述的检测复方三维右旋泛酸钙糖浆4种B族维生素的方法，其特征在于：所述流动相B相中，十二烷基硫酸钠的浓度为1～5mmol/L。

5.根据权利要求1所述的检测复方三维右旋泛酸钙糖浆4种B族维生素的方法，其特征在于：所述HPLC检测过程中，采用的色谱柱为C18色谱柱，尺寸为4.6mm×250mm，5μm。

6.根据权利要求1所述的检测复方三维右旋泛酸钙糖浆4种B族维生素的方法，其特征在于：所述HPLC检测过程中，采用的检测波长为250～270nm。

7.根据权利要求1所述的检测复方三维右旋泛酸钙糖浆4种B族维生素的方法，其特征在于：所述检测方法还包括保留时间测定及标准曲线绘制步骤：以维生素B₁、维生素B₂、维生素B₆和烟酰胺四种维生素对照品标准溶液，利用所述洗脱程序测定保留时间，并绘制维生素浓度与峰面积对应的标准曲线。

8.根据权利要求1所述的检测复方三维右旋泛酸钙糖浆4种B族维生素的方法，其特征在于：所述待测溶液经过以下步骤制得：取待测样品，精密称定后，加入含体积分数为0.01～0.05％甲酸的10％甲醇水溶液溶解，配制成0.18～0.22g/ml的溶液后，过0.45μm滤膜，取续滤液。

9.根据权利要求1所述的检测复方三维右旋泛酸钙糖浆4种B族维生素的方法，其特征在于：

取复方三维泛酸钙糖浆5g，精密称定后，加入含0.05％甲酸的10％甲醇水溶液10ml，振摇20min，移入25ml容量瓶，润洗定容后，摇匀后过0.45μm滤膜，取续滤液制得待测溶液；

以维生素B₁、维生素B₂、维生素B₆和烟酰胺四种维生素对照品标准溶液，利用HPLC测定保留时间，并绘制维生素浓度与峰面积对应的标准曲线；

以乙腈为流动相A相，以含5mmol/L十二烷基硫酸钠的甲酸水溶液为流动相B相；取待测溶液进行HPLC检测后，根据色谱图对维生素B₁、维生素B₂、维生素B₆、烟酰胺4种维生素进行定性和/或定量分析；

所述对照品标准溶液和待测溶液利用HPLC进行检测过程中采用梯度洗脱，洗脱程序为：

0～5min，流动相A相的体积分数为10％；

5～20min，流动相A相的体积分数由10％升至20％；

20～30min，流动相A相的体积分数由20％升至35％；

30～40min，流动相A相的体积分数由35％升至45％；

40～50min，流动相A相的体积分数由45％升至60％；

50～60min，流动相A相的体积分数由60％升至75％；

60～65min，流动相A相的体积分数为75％；

65～70min，流动相A相的体积分数由75％降至10％；

70～80min，流动相A相的体积分数为10％。