[发明专利]一种水芫花黄酮的提取方法

说明书

本发明公开了一种水芫花黄酮的提取方法，首先通过将水芫花进行破碎，并在水溶液中使用纤维素酶将水芫花中的纤维素进行分解，再加入有机溶剂对水芫花黄酮进行提取，然后使用重结晶以及柱层析的方式对水芫花黄酮进行提纯，得到了纯的水芫花黄酮。本发明具有如下有益效果：（1）提取条件温和，操作简单；（2）提取效率高；（3）纯化过程简单，纯化成本低。

技术领域

本发明涉及一种黄酮化合物的提取方法，尤其是涉及一种水芫花黄酮的提取方法。

背景技术

水芫花(学名: Pemphisacidula)，为千屈菜科水芫花属小灌木，分布范围狭窄偏远，主要分布于我国台湾岛南部海岸和其他东半球热带海岸，目前处于濒危状态。水芫花常被用来制作名贵盆景，目前研究主要集中在其生长环境与分布，分类学、生殖学和遗传多样性等，对于其植物体内成分及药理活性却研究较少。在仅有几个研究结果中显示仅仅是经过简单的有机溶剂的提取，得到有机溶剂浸膏，但是却没有提取出其内部的活性成分。

黄酮广泛存在自然界的某些植物和浆果中，总数大约有4千多种，其分子结构不尽相同，如芸香苷、橘皮苷、栎素、绿茶多酚、花色糖苷、花色苷酸等都属黄酮。不同分子结构的黄酮可作用于身体不同的器官，如银杏山楂--心血管系统，蓝梅--眼睛，酸果--尿路系统，葡萄--淋巴、肝脏，接骨木果--免疫系统，平时我们可以通过多食葡萄、洋葱、花椰莱、喝红酒、多饮绿茶等方式来获得黄酮，作为身体的一种补充。黄酮的功效是多方面的，它是一种很强的抗氧剂，可有效清除体内的氧自由基，如花青素可以抑制油脂性过氧化物的全阶段溢出，这种阻止氧化的能力是维生素E的十倍以上，这种抗氧化作用可以阻止细胞的退化、衰老，也可阻止癌症的发生。黄酮可以改善血液循环，可以降低胆固醇，向天果中的黄酮还含有一种PAF抗凝因子，这些作用大大降低了心脑血管疾病的发病率，也可改善心脑血管疾病的症状。

因此如何有效的从水芫花中提纯出黄酮化合物是非常急迫的，例如本发明人曾经在黑龙江医药科学杂志上发表的论文《水芫花提取物的体外抗氧化活性和抑菌活性研究》，其仅仅通过有机溶剂浸提的方式提取出了得石油醚浸膏、氯仿浸膏、乙酸乙酯浸膏和水提浸膏，并对其体外抗氧化活性和抑菌活性进行了分析，但并没有分离出其有效物质。

发明内容

本发明是为了克服现有技术中水芫花黄酮的提取方法时间较长，溶剂使用量大，分离效果较差，提供了一种提取速度快，溶剂使用量较少，分离效果好的一种水芫花黄酮的提取方法。

为了实现上述目的，本发明采用以下技术方案：

一种水芫花黄酮的提取方法，所述的提纯方法包括以下几个步骤：

（a）取水芫花枝茎10份置于粉碎机中粉碎，过100-300目筛子，加入20份蒸馏水，0.5-2份纤维素酶，调节pH至5.5-6.5之间，升高温度至48-60℃酶解3-5小时后，加入200份有机溶剂A，200W超声处理处理30分钟，离心过滤取滤液，静置分层取有机层，得到水芫花黄酮粗提液；

（b）将步骤（a）中的水芫花黄酮粗提液浓缩至原体积的五分之一，然后加入活性炭5-10份，搅拌0.5小时后静置吸附1-3小时，过滤得滤液，减压除去有机溶剂A，得到水芫花黄酮粗产物；

（c）取步骤（b）中的水芫花黄酮粗产物10份加入30-40份水与有机溶剂B 的混合溶剂中，升高温度至75-90℃，使得水芫花黄酮粗产物能够完全溶解，趁热过滤溶液，取滤液快速以10℃/min的速度降温至0-5℃，过滤得到水芫花黄酮快速重结晶产物，快速重结晶重复三次，然后再将水芫花黄酮快速重结晶产物在80-85℃下溶于水与有机溶剂B 的混合溶剂中以1℃/min的速度降温至5-10℃，过滤得到水芫花黄酮慢速重结晶产物，慢速重结晶过程重复3次；

（d）取步骤（d）中的水芫花黄酮慢速重结晶产物进行柱层析，固定相为聚酰胺，洗脱剂为氯仿-甲醇10-5:1混合液，最终得到纯水芫花黄酮。