[发明专利]一种紫脊百合试管小鳞茎繁殖方法

说明书

本发明公开了一种紫脊百合试管小鳞茎繁殖方法，属于生物领域，本发明的目的是提供一种紫脊百合试管小鳞茎繁殖方法，以解决现有百合组织培养常用到的方法对于紫脊百合繁殖会造成幼苗生长缓慢的问题。包括鳞片外植体的消毒步骤，试管小鳞茎的诱导步骤，试管小鳞茎的膨大和生根步骤，小鳞茎催芽生长步骤。小鳞茎诱导培养基由基础培养基和激素组成，基础培养基组成如下:MS基本培养液、蔗糖60g/L、精氨酸0.5g/L、谷氨酰胺0.5g/L、活性炭2g/L、琼脂6g/L、二硫苏糖醇500mg/L、尼泊金丁酯300‑800 mg/L。本发明具有繁殖系数高、培养周期短、效率高、移栽成活率高、方便运输、操作简便、成本低的优点。

技术领域

本发明属于生物领域，具体涉及一种培育紫脊百合试管小鳞茎的方法。

背景技术

宜昌百合是中国特有种，主要分布在湖北和四川，花为喇叭形，有微香，不仅可以提取精油 ，而且具有较高的观赏价值，可用于园林绿化行业，其鳞茎具有镇痛、消炎拔毒、抑菌、抗氧化等作用，可用于功能性食品和药品的开发。紫脊百合野生资源主要分布在甘肃陇南、甘南等秦巴山区沿线；紫脊百合作为宜昌百合的变种，在功能和用途上与宜昌百合具有相似性，在形态上与宜昌百合的区别在于花被片外面为紫色或褐色脊带，紫脊百合分布的海拔在1500-2500m，明显高于宜昌百合分布的海拔范围450-1500m，因此，紫脊百合的耐寒抗旱性强于宜昌百合，年生长期和生长量都小于宜昌百合。特殊的生境塑造了紫脊百合特殊的生物性状，据笔者野外调查及当地农民介绍：紫脊百合繁殖较为困难，生长缓慢，民间有采挖供观赏和食用其鳞茎的习惯，但受制于其繁殖性能，目前尚未规模化种植。

关于紫脊百合的文献报道甚少，但作为一种具有潜在的巨大开发价值的野生资源，对其进行系统地研究具有重大的意义。关于紫脊百合的繁殖问题，笔者采用百合传统的繁殖方法进行了相关研究并总结如下：紫脊百合主要有种子繁殖和鳞片扦插繁殖两种方式，未观察到分株繁殖和株芽繁殖。紫脊百合种子存在形态和生理双重休眠、种子发芽率低（第一个生长周期发芽率大约10%，第二个生长周期发芽率大约50%）、幼苗生长缓慢、实生苗育苗周期长；鳞片扦插繁殖受到次生代谢产物含量高的影响繁殖效率低下（外层鳞片染菌严重、内层鳞片不易分化、只有中层鳞片分化1-2个小鳞茎）、周期长（鳞片基质扦插需要经过6个月的休眠才能开始分化小鳞茎，鳞片大田春季扦插和夏季扦插都要等到秋季或次年春季才开始生长）。

百合组织培养常用到的方法是通过不定芽或体细胞胚诱导的方式培养百合幼苗，进而促进幼苗生根和小鳞茎的膨大，上述方法的不足之处在于幼苗及叶片的生长消耗了大量的营养、费力耗时、增加成本，而且受制于组培条件下光照强度和二氧化碳浓度的问题，组培中产生的叶片光合效率十分低下，炼苗移栽时部分叶片枯死，需要重新长出新的叶片，消耗小鳞茎的营养，造成幼苗生长缓慢，因此，上述方法并不是一种高效的培养策略。

发明内容

本发明的目的是提供一种紫脊百合试管小鳞茎繁殖方法，以解决现有百合组织培养常用到的方法对于紫脊百合繁殖会造成幼苗生长缓慢的问题。

本发明技术方案如下：一种紫脊百合试管小鳞茎繁殖方法，包括以下步骤：

（1）鳞片外植体的消毒

采挖可开花的成年紫脊百合鳞茎，除去最外层有病斑的鳞片，冲洗干净，沿着鳞茎盘将外层和中层鳞片掰下，浸泡，冲洗干净，切去鳞片尖部1/3部分，剩余鳞片纵切为1.5-2厘米的条状备用；

（2）试管小鳞茎的诱导

以上述鳞片为外植体，接种于小鳞茎诱导培养基中，在黑暗条件，温度为25-27℃培养，

小鳞茎诱导培养基由基础培养基和激素组成，基础培养基组成如下: MS基本培养液、蔗糖60g/L、精氨酸0.5g/L、谷氨酰胺0.5g/L、活性炭2g/L、琼脂6g/L、二硫苏糖醇500mg/L、尼泊金丁酯300-800 mg/L；