[发明专利]一种胰岛素样生长因子结合蛋白-3的定量检测试剂盒及其非诊断目的的检测方法在审
申请号: | 201711143777.3 | 申请日: | 2017-11-17 |
公开(公告)号: | CN107991492A | 公开(公告)日: | 2018-05-04 |
发明(设计)人: | 陈海佳;葛啸虎;王一飞;陈婉玲;岳坤;姜交华 | 申请(专利权)人: | 广州赛莱拉干细胞科技股份有限公司 |
主分类号: | G01N33/68 | 分类号: | G01N33/68 |
代理公司: | 北京集佳知识产权代理有限公司11227 | 代理人: | 潘颖,赵青朵 |
地址: | 510000 广东省广州市开发区广*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 胰岛素 生长因子 结合 蛋白 定量 检测 试剂盒 及其 诊断 目的 方法 | ||
1.一种胰岛素样生长因子结合蛋白-3的定量检测试剂盒,其特征在于,所述定量检测试剂盒包括:IGFBP-3单克隆抗体,IGFBP-3重组抗原标准品,生物素化的IGFBP-3多克隆抗体,酶标记的链霉亲和素,显色底物,终止液。
2.根据权利要求1所述的定量检测试剂盒,其特征在于,所述IGFBP-3单克隆抗体的浓度为0.1~10μg/mL。
3.根据权利要求1所述的定量检测试剂盒,其特征在于,所述IGFBP-3重组抗原标准品的浓度为50~100ng/mL。
4.根据权利要求1所述的定量检测试剂盒,其特征在于,所述生物素化的IGFBP-3多克隆抗体的浓度为0.1~1.0μg/mL。
5.根据权利要求1所述的定量检测试剂盒,其特征在于,所述酶标记的链霉亲和素为HRP标记的链霉亲和素。
6.根据权利要求1至5中任一项所述的定量检测试剂盒,其特征在于,所述显色底物为四甲基联苯胺。
7.一种非诊断目的的检测胰岛素样生长因子结合蛋白-3浓度的方法,其特征在于,包括如下步骤:
步骤1:将IGFBP-3单克隆抗体包被于固相载体表面,封闭;
步骤2:将IGFBP-3重组抗原标准品或样品中的一种、生物素化的IGFBP-3多克隆抗体与所述IGFBP-3单克隆抗体共同孵育;
步骤3:加入酶标记的链霉亲和素进行孵育;
步骤4:加入显色底物进行显色,终止显色后在450nm的波长下检测OD值;
步骤5:根据梯度浓度的IGFBP-3重组抗原标准品的OD值绘制标准曲线,然后根据样品的OD值和标准曲线,得到样品中IGFBP-3的浓度。
8.根据权利要求7所述的方法,其特征在于,步骤1中所述包被的温度为4℃,时间为8~12小时。
9.根据权利要求7所述的方法,其特征在于,步骤2中所述孵育的温度为37℃,时间为1~2小时;步骤3中所述孵育的温度为37℃,时间为1~2小时。
10.根据权利要求7至9中任一项所述的方法,其特征在于,所述酶标记的链霉亲和素的稀释倍数为500~1500。
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