[发明专利]抗环瓜氨酸肽抗体测定试剂盒

权利要求书

1.一种抗环瓜氨酸肽抗体检测试剂盒，其特征在于：由彼此独立的试剂R1和试剂R2组成；其中，每1升试剂R1中各组分的用量为：三羟甲基氨基甲烷6.057g，聚乙二醇6000 4g，曲拉通X-100 10ml，氯化钠10g；每1升试剂R2中各组分的用量为：包被抗环瓜氨酸肽抗原的乳胶颗粒5mg，三羟甲基氨基甲烷6.057g，牛血清蛋白1g，叠氮化钠1g，聚六亚甲基胍0.5g，苯甲醇0.2g；其中，所述的乳胶颗粒为粒径0.8-1.3μm的聚苯乙烯乳胶颗粒。

2.按照权利要求1所述的检测试剂盒，其特征在于，所述包被抗环瓜氨酸肽抗原的乳胶颗粒的制备方法为：

(1)用MES缓冲液将表面带有羧基功能基团、直径0 .5-1 .5μm的聚苯乙烯微粒稀释至终浓度为0.5-3％(wt)，加入50-90mM EDAC，混合均匀，室温震荡反应30-80分钟；

(2)将步骤(1)所得混合液离心，弃上清液，用MES缓冲液清洗两次，最终胶乳微粒重悬于MES缓冲液，超声进行分散，得微粒分散液；

(3)用MES缓冲液稀释抗环瓜氨酸肽抗原，与步骤(2)中微粒分散液混合，于室温反应2-4小时；

(4)将步骤(3)所得反应液18000rpm离心30min后，用Tris缓冲液重悬微粒，室温封闭反应1-3小时；

(5)将步骤(4)所得反应液离心，弃上清液，用Tris缓冲液清洗胶乳3次，最后用R2试剂保存液重悬胶乳沉淀并稀释至1％，超声充分分散后即获得包被抗环瓜氨酸肽抗原的乳胶颗粒。

3.按照权利要求1或2所述的检测试剂盒，其特征在于：试剂R1的pH值范围为6.5-8.5。

4.按照权利要求1或2所述的检测试剂盒，其特征在于：检测主波长为546nm，副波长为800nm，测定方法采用终点法：150μl试剂R1加入5μl样本，于37℃温育5min后加入50μl试剂R2即开始读数，5min后再次读数，然后计算吸光度算差值。

5.按照权利要求1或2所述的检测试剂盒，其特征在于：用于测定人血清中抗环瓜氨酸肽抗体的含量。