[发明专利]一种免疫凝集和胶体金层析试纸条相结合的用于检测HIT抗体的系统

说明书

技术领域

本发明属于医学检测领域，涉及一种免疫凝集和胶体金层析试纸条相结合的用于检测HIT抗体的系统。

背景技术

肝素是临床中最常使用的抗凝药物。包括普通肝素、低分子量肝素、类肝素以及其它硫酸氨基葡聚糖等肝素制剂。肝素在使用过程中会产生肝素/血小板因子4复合物抗体(AHPF4抗体，又称HIT抗体)，HIT抗体可引起肝素诱导的血小板减少症(heparin-induced thrombocytopenia，HIT)。普通肝素治疗引起的HIT的发生率为1％-5％，低分子量肝素的引发率低于普通肝素。约50％的HIT患者会合并发生严重的并发症-血栓形成综合症(HIT with thrombosis syndrome，HITTS)，包括深静脉血栓形成、肺栓塞、动脉血栓形成、外周动脉栓塞、脑卒中、肢体坏疽等。

针对HIT，临床上尚无可靠确诊的方法，目前主要根据临床表现并结合HIT抗体检测而诊断。目前HIT抗体相关的检测方法包括功能性测定(检测抗体激活血小板能力)和免疫性测定(检测抗体的滴度。功能性血小板试验包括血小板凝集试验(PAgT)、肝素诱导血小板聚集试验(HIPA)、¹⁴C血清素释放试验(SRA)等。SRA是目前最敏感和特异的检测HIT抗体的实验室方法，但它需要放射性同位素示踪剂，且需要新鲜正常的供体血小板，致使试验操作复杂、耗费时间长。免疫学检测主要包括酶联免疫吸附测定法(ELISA)、膜吸附酶联免疫滤过测定法(ELIFA)、粒胶凝集免疫测定法(PaGIA)和流式细胞仪测定等。上述各个现存的HIT抗体检测技术和方法，均存在诸多缺陷，目前尚缺乏一种实用、简便、快捷的检测方法。

发明内容

本发明的目的是提供一种免疫凝集和胶体金层析试纸条相结合的用于检测HIT抗体的系统。

本发明提供了一种用于检测HIT抗体的系统，包括血小板因子4/肝素复合物与蓝色乳胶微球的偶联物、试纸条和反应检测装置；

蓝色乳胶微球的粒径为0.1-1μm；

试纸条包括底板1、样品垫2、胶体金垫3、检测垫4、吸水垫5和过滤膜6；沿样品流动方向，样品垫、胶体金垫、检测垫和吸水垫依次固定于底板上；胶体金垫上附着有胶体金标记的抗人IgG抗体；检测垫上表面具有C线7，C线与样品流动方向垂直，C线上附着有人IgG蛋白；样品垫上表面固定过滤膜；过滤膜为微孔膜，孔径为0.1-1.5μm；

反应检测装置包括反应部件和检测部件；检测部件为具有试纸条固定区8的基板；试纸条固定区与试纸条形状对应，设置有对应试纸条的过滤膜的通孔甲9、用于观察试纸条的检测垫的通孔乙10和用于观察试纸条的C线的通孔丙11；通孔乙位于通孔甲和通孔丙之间；通孔甲上方具有凸出基板平面的环形侧壁；反应部件上具有反应池12和导流槽13；导流槽的一端与反应池连通，另一端开口于检测部件的环形侧壁从而与通孔甲连通；导流槽为倾斜状，与反应池连通的一端高于与通孔甲连通的一端；导流槽与反应池连通的部位设有处于闭合状态的开关14。

过滤膜为圆形。

通孔甲为圆形。

通孔甲的孔径小于过滤膜的直径。

过滤膜直径为1cm。

通孔甲直径为0.9cm。

通孔乙为圆形。

通孔乙直径为0.6cm。

蓝色乳胶微球的粒径为0.3μm。

微孔膜的孔径为0.45μm。

C线到吸水垫与检测垫的边缘线的距离为0.5-1.5cm(具体可为1cm)。

通孔乙对应的试纸条中的区域到吸水垫与检测垫的边缘线的距离为3-4cm。

每厘米C线上附着有0.5μg人IgG蛋白。

每平方厘米胶体金垫上附着有12μg胶体金标记的兔抗人IgG抗体。

沿样品流动方向作为试纸条的长度方向，与长度方向垂直的方向作为试纸条的宽度方向；试纸条的宽度为1cm；试纸条的总长度为12cm，其中样品垫的长度为1.5cm，胶体金垫的长度为1.5cm，检测垫的长度为8cm，吸水垫的长度为1cm。

样品垫的材质具体可为玻璃纤维膜。

胶体金垫的材质具体可为玻璃纤维膜。

检测垫的材质具体可为硝酸纤维素膜。

吸水垫的材质具体可为吸水纸。

过滤膜的材质为硝酸纤维素膜(nitrocellulose filter membrane，简称NC膜)或者聚偏二氟乙烯膜(polyvinylidene fluoride，简称PVDF膜)。

底板仅起支撑作用，常规材质均可，例如软质塑料。