[发明专利]一种具有抗衰老活性的甘草多糖的制备方法

说明书

本发明提供了一种甘草多糖的制备方法。本发明选用特定的溶剂，通过简单的溶剂混合步骤即可得到具有较高抗衰老活性的甘草多糖，方法简单。

技术领域

本发明属于天然产物提取技术领域，具体涉及一种具有抗衰老活性的甘草多糖的制备方法。

背景技术

甘草多糖是甘草的主要活性成分之一，周蓉等对甘草多糖分离纯化后，样品经高效毛细管电泳分析表明，该多糖组分由鼠李糖、葡聚糖、阿拉伯糖和半乳糖组成，并以葡聚糖为主链。Takada K对从西北甘草匍匐茎中分离的甘草多糖进行控制Smith降解和限制水解。第一、二Smith降解产物和限制水解产物的甲基化分析表明，甘草多糖的核心结构含有由β-1,3-连接的D-半乳糖残基组成的一个主链。主链的3/5半乳糖单元在6位带有β-1,3-和β-1,6-D-半乳糖残基组成的侧链。

甘草多糖制备方法一般分为微波提取、超声提取、酶法提取、传统水提法等。(1)孙平等将甘草依次经石油醚(60～90℃)、乙醚和80％乙醇微波技术处理后，残渣在微波反应器中加水提取，提取液加活性炭脱色、醇沉后得甘草多糖，多糖含量仅13.9％。(2)刘霞、谢建新等将甘草破碎经依次经石油醚(60～90℃)、乙醚和80％乙醇超声处理后，残渣加水超声提取，所得提取液经活性炭脱色、醇沉得甘草多糖，多糖含量仅为14.01％。(3)李彩君等用纤维素酶处理甘草，并通过正交实验确定甘草多糖酶法提取的最佳工艺参数，该最佳条件下甘草多糖的提取率w＝32.9g/kg。(4)张泽生等通过单因素实验与正交实验研究甘草多糖提取工艺确定的最佳提取条件为30倍料液比，90℃，提取0.5h，提取2次，并未说明所得甘草多糖含量。(5)代巧玉等人对甘草多糖纯化进行了综述，纯化分为去蛋白、去除小分子等过程，蛋白质的去除方法通常有Sevag法、三氯乙酸法、三氟三氯乙烷法、酶法、盐酸法和鞣酸法，这些方法可以单独使用，也可以两种或多种方法结合使用。而去小分子方法主要有分级沉淀、季铵盐沉淀法、凝胶柱层析和离子交换色谱法等。

甘草多糖作为多糖的一种，研究表明具有多种功效：(1)免疫调节作用：程安玮研究表明巨噬细胞受到甘草多糖刺激进一步分化成熟，成为活化巨噬细胞，使细胞体积增大，活力增强，糖氧化作用和吞噬功能增加，促使细胞内溶菌酶大量增多，细胞内DNA、RNA、糖原体、ACPase、ANAE、ATPase 和SDH等多种酶活性显著增强，并能明显增强SOD和O2-的活性。王丽荣等将从甘草根中提取的甘草多糖，以不同剂量给予试验小白鼠,在试验期内甘草多糖能明显提高小鼠体重和淋巴细胞的E-玫瑰花环形成率。(2)抗病毒作用:常雅萍等用甘草多糖对7种RNA和DNA类病毒作了体外抗病毒研究。结果表明，甘草多糖对水疤性口炎病毒、腺病毒II型，HSV-Ⅰ和牛痘病毒均有明显的抑制作用。(3)抗肿瘤作用，王忱等将BALB/C小鼠接种S180荷瘤株后分别给与甘草多糖和对照药物12d后处死,取出荷瘤小鼠的肿瘤称重，结果表明给与甘草多糖的小鼠肿瘤明显小于对照组。王岳五等实验也表明，甘草多糖具有一定的抗肿瘤活性，可以延长腹水瘤小鼠的生存期，抑制实体瘤的生长。此外，赵云生等研究表明，甘草多糖对毛细血管炎性渗透及乙醇型与利血平型胃溃疡均具有抑制作用，量效关系明显。

综上所述，目前要得到具有活性的甘草多糖其方法存在耗时长，生产成本高，步骤繁琐，所得多糖活性较低，无法工业化生产等缺点。

发明内容

有鉴于此，本发明要解决的技术问题在于提供一种甘草多糖的制备方法，本发明制备得到甘草多糖具有显著的抗衰老活性，且制备方法简单。

本发明提供了一种甘草多糖的制备方法，包括以下步骤：

A)将甘草原料与一号溶剂混合加热，过滤，得到甘草多糖粗品；

所述一号溶剂选自磷酸水溶液、醋酸水溶液、盐酸水溶液、硫酸水溶液、甲醇、乙醇、异丙醇和丙酮中的一种或多种；

B)将所述甘草多糖粗品与二号溶剂混合，得到混合溶液，向所述混合溶液中加入三号溶剂混合，静置分层，得到上层清液；