[发明专利]一种七甲川菁类活性荧光探针及其制备方法与应用

权利要求书

1.一种七甲川菁类活性荧光探针七甲川菁类活性荧光探针，其特征在于该探针的结构通式如下：

通式中:

X = Ⅱ - Ⅸ；

R1、R2分别为： (CH2)mCH3、(CH2)nOH、(CH2CH2O)pCH3、CH2C6H5；

R3、R4分别为： H、SO3H、SO3Na、SO3K；

a，b,c,d,e,f,g分别为：2 - 8；

n、m、p分别为： 1-10;

其中，a，b,c,d,e,f,g，n，m，p分别为相互独立的整数。

2.权利要求1所述的七甲川菁类活性荧光探针的制备方法，其特征在于经过下述步骤：

1）首先，起始原料吲哚啉与烷基化试剂在氩气保护下，以甲苯为溶剂进行回流，发生季铵化反应，生成烷基取代的吲哚季铵盐中间体，其次，以无水醋酸钠为催化剂，与2-氯-1-甲酰基-3-羟甲基环己烯在无水乙酸酐中进行缩合反应，反应温度为25-70℃，得到带有环己烯氯的七甲川3H-吲哚菁母体染料，结构式如下：

2）在氩气保护下，以无水甲醇为溶剂，N,N-二异丙基乙胺为缚酸剂，环己烯氯母体染料与含有不同化学反应活性位点的氮衍生物进行亲核取代反应，反应温度为40-70℃。反应完成后用无水乙醚沉淀，析出大量固体，以二氯甲烷/甲醇为洗脱液，利用中压快速制备色谱分离，得到目标产物；

其中，X 、R1、R2、 R3、R4的取值如上述定义。

3.按照权利要求2所述的制备方法，其特征在于所述的烷基化试剂为碘取代脂肪烃或苄基溴。

4.按照权利要求2所述的制备方法，其特征在于步骤1）所述的吲哚啉与烷基化试剂的摩尔比为1:1.5-1:5。

5.按照权利要求2所述的制备方法，其特征在于步骤2）所述的母体染料与氮衍生物的摩尔比为1:3。

6.权利要求1所述的七甲川菁类活性荧光探针用于高灵敏蛋白、多糖、DNA和有机、无机纳米载体标记，进行细胞水平和活体水平上的检测及成像。