[发明专利]一种党参离体再生体系的建立技术

权利要求书

1.一种党参离体再生体系的建立技术，其特征在于包括以下工艺步骤：

（1）外植体的处理：选取健壮党参植株上切取带腋芽的茎段作为外植体，剪去叶片，切成5.1长的带有3个腋芽的节段先用洗衣粉水冲洗4h，再用毛轻刷洗外植体表面将其表面的尘土和部分菌体去除，然后用自来水冲洗4h后置于超净工作台中，先用70%乙醇消毒31s后用无菌水洗6次，再用0.1%升汞溶液消毒11min，用无菌水冲洗8次再用无菌滤纸擦干表面的水珠后备用；

（2）丛生芽导：将步骤（1）处理后的党参带腋芽茎段切成2.6cm小段并接种到诱导培养基上,先在29℃条件下全暗培养6天，然后每天光照13小时，光照强度为3100lx，直至诱导形成丛生芽;

（3）增殖培养：将步骤（2）培养获得的嫩芽长至约3cm时切离并转入增殖培养基上进行继代培养，接种后先在29℃条件下全暗培养5天，然后每天光照17小时，光照强度为5100lx，培养温度为29℃的条件下培养，多次反复切割进行继代培养，以得到更多的丛生芽;

（4）生根培养：当步骤（2）或（3）的丛生芽长至3.6cm高时，将丛生芽切割成单苗接种至生根培养基中进行生根培养，接种后先在29℃条件下全暗培养5天，然后每天光照17小时，光照强度为3100lx，培养温度为29℃的条件下培养直至长出根;

（5）试管苗移栽：当小苗长出的新根系长达4cm左右时，并且长出侧根，苗高6cm以上时，将培养瓶瓶盖打开并置于自然光照下炼苗8天后，将试管苗从培养瓶中取出，洗掉根部培养基，尽量不伤害根部，栽入经灭菌过的蛭石中。

2. 根据权利要求1所述的一种党参离体再生体系的建立技术，其特征在于步骤（2）所述的诱导培养基为：MS+ 4mg/L NAA+ 3mg/L 6-BA+ 2mg/L KT+3.6%蔗糖+0.6%琼脂+0.2%活性炭，pH值为5.6。

3. 根据权利要求1所述的一种党参离体再生体系的建立技术，其特征在于步骤（3）所述的增殖培养基为：MS+3.1mg/L 6-BA+1.1mg/L NAA+3.6%蔗糖+0.6%琼脂+0.2%活性炭，pH值为5.8。

4. 根据权利要求1所述的一种党参离体再生体系的建立技术，其特征在于步骤（5）所述的生根培养基为：MS+14.5mg/L KH₂PO₄+3.0%蔗糖+0.7%琼脂+0.2%活性炭，pH值为5.9。