[发明专利]脆弱拟杆菌荚膜多糖硫酸酯及其制备方法和应用

说明书

本发明涉及一种脆弱拟杆菌荚膜多糖硫酸酯及其制备方法和应用。本发明首次对脆弱拟杆菌荚膜多糖进行了硫酸酯化修饰，通过将脆弱拟杆菌荚膜多糖与硫酸化试剂进行硫酸酯反应，得到了脆弱拟杆菌荚膜多糖硫酸酯。通过进一步实验研究发现本发明的脆弱拟杆菌荚膜多糖硫酸酯具有显著的治疗和预防溃疡性结肠炎的作用，其效果优于被修饰前的脆弱拟杆菌荚膜多糖，其可以单独进行预防性或治疗性给药，或者与脆弱拟杆菌荚膜多糖或其它药物一起给药。

技术领域

本发明涉及生物医药领域，特别是涉及一种脆弱拟杆菌荚膜多糖硫酸酯及其制备方法和应用。

背景技术

溃疡性结肠炎(Ulcerative Colitis，UC)是炎症性肠病的一种，病因不明确，主要与遗传因素、免疫因素和环境因素有关。临床症状以黏液脓血便、腹痛、腹泻或里急后重为主；重症病例，全身症状明显，多伴有肝损害、关节炎、皮肤损害、心肌病变、虹膜睫状体炎及内分泌疾病等。

目前对UC的治疗方法主要为氨基水杨酸类药物，代表性品种为美沙拉秦。根据米内网数据显示，氨基水杨酸类药物2015年的销售额超过8亿元，同比增长15.2％；其中美沙拉秦占据87.9％的市场，同比增长率为17.2％；相比之下其它氨基水杨酸类药物的市场份额小，销售处于稳定趋势。

但是氨基水杨酸类药物副作用较大，常见恶心、呕吐、食欲缺乏、腹泻、腹痛等；起效量很高，为0.2-0.3g/kg。因此，有必要研究治疗溃疡性结肠炎的新药物。

发明内容

基于此，本发明提供了一种脆弱拟杆菌荚膜多糖硫酸酯，该荚膜多糖硫酸酯对溃疡性结肠炎具有很好的防治效果。

具体技术方案如下：

一种脆弱拟杆菌荚膜多糖硫酸酯，由脆弱拟杆菌荚膜多糖和硫酸化试剂进行硫酸酯化反应得到，其中，所述脆弱拟杆菌荚膜多糖中的全部或部分羟基在反应后被替换为硫酸酯基，所述脆弱拟杆菌荚膜多糖具有式(I)所示结构：

式(I)中n大于或等于1。

在其中一些实施例中，所述脆弱拟杆菌荚膜多糖的分子量为5-75KD。

在其中一些实施例中，所述脆弱拟杆菌荚膜多糖硫酸酯的硫代度为0.5-1.2。

本发明还提供了上述脆弱拟杆菌荚膜多糖硫酸酯的制备方法。

具体技术方案如下：

一种上述脆弱拟杆菌荚膜多糖硫酸酯的制备方法，包括以下步骤：

1)取所述脆弱拟杆菌荚膜多糖，加入溶剂，制备成悬浮液；

2)在所述悬浮液中加入硫酸化试剂进行硫酸酯化反应，冷却后调节pH至中性，离心，收集上清液，将所述上清液用流水透析，再用乙醇水溶液进行沉淀，离心，收集沉淀物，将所述沉淀物冷冻干燥，得冻干粉末；所述硫酸化试剂由氯磺酸与无水吡啶制备得到；

3)将所述冻干粉末进行纯化，得到所述脆弱拟杆菌荚膜多糖硫酸酯。

在其中一些实施例中，步骤1)中所述溶剂为二甲基亚砜；步骤1)所述悬浮液中，脆弱拟杆菌荚膜多糖的浓度为10-50mg/mL。

在其中一些实施例中，步骤2)中所述硫酸酯化试剂的制备方法包括以下步骤：

在-15至-10℃以及剧烈搅拌的条件下，向预冷至0-4℃的无水吡啶中逐滴加入氯磺酸，所述氯磺酸与所述无水吡啶的体积比1:5-10，即得硫酸酯化试剂。

在其中一些实施例中，步骤2)中所述悬浮液和所述酯化试剂的体积比为1:2-6；

在其中一些实施例中，步骤2)中所述硫酸酯化反应的条件为：60-90℃持续搅拌反应2-4h；