[发明专利]一种多花兰的种子繁殖方法

说明书

【技术领域】

本发明涉及植物繁殖技术领域，具体涉及一种多花兰的种子繁殖方法。

【背景技术】

多花兰(Cymbidium floribundum)为兰科兰属附生类植物，属《濒危野生动植物种国际贸易公约》附录Ⅱ物种，为我国二级保护植物。多花兰主要分布于云南、广西、广东、福建等我国长江以南各省；生于海拔100-3300m的林中、林缘树上，或沿溪谷岩壁上。其叶带型革质、具有光泽，抗旱防寒力强；花带香气，花期较长，花色繁丽多姿，具有较高的观赏价值，是较理想的盆栽花卉之一。

多花兰花芽易分化，花期长，栽培容易，生长快，适应性强，是很好的观赏花卉。长期以来，多花兰以分株繁殖为主，但繁殖速度慢。想要在短时间内得到更多的植株，可以利用组织培养的方式繁殖，国内对多花兰进行组培繁殖的报道很少。目前，也有一些学者研究了采用多花兰蒴果做外植体进行组织培养得到多花兰苗的方法，但由于相关的研究较少，没有找到更适合茎尖分化组织生长的培养基，导致组织培养过程中，培养周期长，培养成效不尽人意。

【发明内容】

本发明的发明目的在于：针对上述存在的问题，提供一种多花兰的种子繁殖方法，本发明提供的培养基配方可显著提高多花兰的诱导分化率、外植体增殖系数及生根率，缩短培养周期，提高多花兰组培苗的质量。

为了实现上述目的，本发明采用的技术方案如下：

一种多花兰的种子繁殖方法，包括外植体的消毒、诱导培养、继代培养及壮苗培养，具体步骤为：

(1)外植体的消毒：采集多花兰授粉后的蒴果作为外植体，首先用流水冲洗，再用体积浓度为75％的酒精浸泡1-2min，接着用质量浓度为0.1％的HgCl₂液消毒10-15分钟，用无菌水冲洗2-4次，将果实两端切去，剖开果实，果实内的种子用于接种；

(2)诱导培养：将所述果实内的种子均匀撒在诱导培养基内，在温度为25±1℃，光照为2000LX，每天光照10-14h的条件下培养50-55天，得多花兰园球茎；所述诱导培养基的组成为：VW+氯乙醇0.8mg/L-1.2mg/L+琼脂5.0g/L-8.0g/L+蔗糖2.0g/L-4.0g/L+辣木叶汁5.0g/L-8.0g/L+枸杞叶汁3.0g/L-5.0g/L；

(3)继代培养：将步骤(2)中生长得到的多花兰园球茎转接入继代培养基内，在温度为25±1℃，光照为2000LX，每天光照10-14h的条件下培养，随着园球茎的生长不断更换培养基，继代培养80-85天后，得到长根长叶的多花兰幼株；

(4)壮苗培养：将多花兰幼株转接到壮苗培养基中，培养至根数为3-5条，叶片3-4片，苗高4-8cm，即得到可以移栽的多花兰幼苗。

本发明中，优选地，所述继代培养基的组成为:MS+活性炭1g/L+萘乙酸2mg/L-3mg/L+琼脂5.0g/L-8.0g/L+辣木叶汁5.0g/L-8.0g/L+枸杞叶汁3.0g/L-5.0g/L+蔗糖2.0g/L-4.0g/L。

本发明中，优选地，所述壮苗培养基的组成为:1/2MS+活性炭1g/L+吲哚丁酸0.4mg/L-0.6mg/L+琼脂5.0g/L-8.0g/L+辣木叶汁5.0g/L-8.0g/L+枸杞叶汁3.0g/L-5.0g/L+蔗糖2.0g/L-4.0g/L。

本发明中，优选地，所述辣木叶汁和枸杞叶汁的制备方法是：先洗净叶片然后充分捣碎，再用纱布过滤，所述滤液即为相应的汁。

综上所述，由于采用了上述技术方案，本发明的有益效果是：

本发明采用的培养基中添加了辣木叶汁和枸杞叶汁作为营养物质，辣木叶中含有多种矿物质、维生素、20种氨基酸、46种抗氧素和36种自然防炎体和矿物质，每100克的辣木中含有的维生素C是柑橘的7倍，铁是菠菜的3倍，维生素A是胡萝卜的4倍，钙质是牛奶的4倍，钾是香蕉的3倍，蛋白质是酸奶的2倍；枸杞叶富含甜菜碱、芦丁以及多种氨基酸和微量元素等，这两种物质的联合添加，与生长调节剂、基础培养基一起作用，可以显著提高多花兰的诱导分化率、外植体增殖系数及生根率，缩短培养周期，并提高多花兰组培苗的质量。

【具体实施方式】

为了更清楚地表达本发明，以下通过具体实施例对本发明作进一步说明。

在本发明的实施例中，辣木叶汁、枸杞叶汁的制备方法如下：

辣木叶汁：先洗净叶片然后充分捣碎，再用纱布过滤，所述滤液即为辣木叶汁。

枸杞叶汁：先洗净叶片然后充分捣碎，再用纱布过滤，所述滤液即为辣木叶汁。