[发明专利]一种香加皮化学成分的提取分离方法

权利要求书

1.一种香加皮化学成分的提取分离方法，其特征在于所述提取分离方法包括以下步骤：

（1）取香加皮药材，以50-80%乙醇为提取溶剂，过滤，回收乙醇，得药液，备用；

（2）取步骤（1）所得药液，经大孔吸附树脂纯化，采用50-80%乙醇为洗脱剂，收集洗脱液，浓缩，干燥，得干膏，备用；

（3）取步骤（2）所得干膏，加甲醇溶解，经中低压硅胶柱色谱，洗脱剂为三氯甲烷-甲醇梯度，洗脱比例为1：0，20：1，15：1，10：1，5：1，2：1，0：1，收集三氯甲烷-甲醇为20：1的洗脱液，按照洗脱顺序依次等量收集三份，前两部分分别标记为洗脱液第一部分、洗脱液第二部分；收集三氯甲烷-甲醇为5：1的洗脱液，按照洗脱顺序依次等量收集两份，第二份标记为洗脱液第三部分，备用；

（4）取步骤（3）所得三部分洗脱液，分别经制备HPLC分离，既得十三种化合物。

2.根据权利要求1所述的提取分离方法，其特征在于，所述步骤（4）制备HPLC分离，第一部分洗脱液的色谱条件为：色谱柱：C18制备色谱柱，流动相：甲醇—水，梯度洗脱：0~10min，40~50%甲醇，10~30min,50%甲醇，30~50min，50~60%甲醇，50~60min，60~90%甲醇，60~65min，90~40%甲醇，65~75min,40%甲醇，每次进样体积为100-500μL，得到化合物1和化合物2；所述步骤（4）制备HPLC分离，第二部分洗脱液的色谱条件为：色谱柱：C18制备色谱柱，流动相：甲醇—水，梯度洗脱：0~15min，30~40%，15~25min，40~50%，25~55min，50~90%，55~65min，90~30%，65~75min，30%，每次进样体积为100-500μL，得到化合物7，化合物8，化合物9，化合物10，化合物11，化合物12和化合物13；所述步骤（4）制备HPLC分离，第三部分洗脱液的色谱条件为：色谱柱：C18制备色谱柱，流动相：甲醇—水，梯度洗脱：0~10min，30~50%，10~20min，50%，20~50min，50~90%，50~60min，90~30%，60~70min，30%，每次进样体积为100-500μL，得到化合物3，化合物4，化合物5，化合物6。

3.根据权利要求1所述的提取分离方法，其特征在于，所述步骤（4）制备HPLC分离，流动相为乙腈—水。

4.根据权利要求1或2所述的提取分离方法，其特征在于，所述步骤（1）的提取溶剂为70%乙醇。

5.根据权利要求1或2所述的提取分离方法，其特征在于，所述步骤（2）的大孔吸附树脂为AB-8型、HPD722型、HPD100型、HPD910型或D101型。

6.根据权利要求1或2所述的提取分离方法，其特征在于，所述步骤（4）的色谱柱为SunFireTMPrepC18制备色谱柱，色谱柱规格20mm×250mm，5μm。

7.根据权利要求1或2所述的提取分离方法，其特征在于，所述步骤（4）的色谱柱为SinoChromODS-AP制备色谱柱，色谱柱规格20mm×250mm，10μm。

8.根据权利要求1或2所述的提取分离方法，其特征在于，所述步骤（4）的色谱柱为InertsilODS-3制备色谱柱，色谱柱规格20mm×250mm，10μm。

9.根据权利要求1或2所述的提取分离方法，其特征在于，所述步骤（4）的色谱柱为AglientzorbaxC18制备色谱柱，色谱柱规格21.2mm×250mm，7μm。

10.根据权利要求2所述的提取分离方法，其特征在于，所述进样体积为400μL。