[发明专利]犬基因组17个基因座的荧光标记复合扩增检测试剂盒及检测方法和应用

权利要求书

1.犬基因组17个基因座的荧光标记复合扩增检测试剂盒，其特征在于，试剂盒包括用于特异性扩增犬基因组17个基因座的17组引物对，17个基因座分别为FH2658、FH2004、FH2309、PEZ21、CHR.X、FH2361、ZUBECA4、FH2137、FH2508、FH3241、WILMS-TF、ZUBCA6、SRY、REN214L11、PEZ01、PEZ16和PEZ17，所述引物对如SEQ ID №1～34所示，各基因座的引物浓度如下所示：

,

各引物对中至少有一个引物的5’端具有荧光染料标记，对应17个基因座的引物对分为四组并分别以四种不同的荧光染料进行标记，其中：FH2658、FH2004和FH2309为第一组，PEZ21、CHR.X、FH2361和ZUBECA4为第二组，FH2137、FH2508、FH3241、WILMS-TF和ZUBCA6为第三组，SRY、REN214L11、PEZ01、PEZ16和PEZ17为第四组。

2.根据权利要求1所述的犬基因组17个基因座的荧光标记复合扩增检测试剂盒，其特征在于，四组引物对分别采用FAM、HEX、TAMRA和ROX荧光染料标记，第一组采用FAM标记，第二组采用HEX标记，第三组采用TAMRA标记，第四组采用ROX标记。

3.根据权利要求1或2所述的犬基因组17个基因座的荧光标记复合扩增检测试剂盒，其特征在于，还包括反应混合物、5U/μl的热启动C-Taq酶和sdH₂O。

4.一种犬基因组17个基因座的荧光标记复合扩增检测方法，其特征在于，取如权利要求1～3任一项所述的犬基因组17个基因座的荧光标记复合扩增检测试剂盒，将待检测样品进行聚合酶链式反应扩增，并将扩增产物在遗传分析仪上进行荧光检测，所述聚合酶链式反应程序为：

初始变性：95℃2min；

热循环：94℃1min，59℃1min，72℃1min，重复10个循环；94℃1min，58℃1min，72℃1min，重复18个循环；

终延伸：72℃10min。

5.权利要求1～3所述犬基因组17个基因座的荧光标记复合扩增检测试剂盒在犬的身份鉴定及亲权鉴定中的应用。