[发明专利]一种复方透骨草制剂的中药指纹图谱检测方法

说明书

本发明涉及一种复方透骨草制剂的中药指纹图谱检测方法，包括：(1)对照品溶液的制备；(2)供试品溶液的制备；(3)高效液相色谱法测定：色谱条件为色谱柱：C18柱，柱温20～40℃，流动相0.05～0.15vol％磷酸水溶液和乙腈梯度洗脱，测定波长210～240nm。本发明还基于多批次复方透骨草制剂建立了标准指纹图谱，提供了复方透骨草制剂的质量检测方法。本发明可用于指导生产制备过程投料、规范生产操作，以保证自始而终全过程质量控制的完整性，确保临床用药的安全、有效、稳定。

技术领域

本发明涉及中药制剂的质量检测领域，具体地说，特别涉及一种复方透骨草制剂的中药指纹图谱检测方法。

背景技术

复方透骨草溶液是上海中医药大学附属岳阳中西医结合医院在上海市食品药品监督管理局注册的医院制剂，药品标准编号为：SYZ-ZF-271-2005。本院也就该药品组方申请了中国发明专利，公开号为CN104000919A，公开日为2014.08.27。复方透骨草制剂的组方为：透骨草20-40份、花椒50-70份、皂荚20-40份、木鳖子4-8份，还包括明矾，以上药效成分与明矾的重量比为1:0.43-0.53。复方透骨草溶液的制备方法为：将以上组方中的各组分按比例混合，用米醋浸渍，滤过，即得所述的复方透骨草溶液。其功能与主治：清热燥湿、杀虫止痒，用于治疗手足癣。

中药指纹图谱是指某些中药材或中药制剂经适当处理后，采用一定的分析手段，得到的能够标示其化学特征的色谱图或光谱图。中药指纹图谱是一种综合的、可量化的鉴定手段，它是建立在中药化学成分系统研究的基础上，主要用于评价中药材以及中药制剂半成品质量的真实性、优良性和稳定性。以指纹图谱作为中药(天然药物)提取物及其制剂的质量控制方法，已成为目前国际共识，各种符合中药(天然药物)特色的指纹图谱控制技术体系正在研究和建立。

专利文献CN102539607A，公开日2012.07.04，公开了一种芪麝丸制剂的中药指纹图谱检测方法，包括：(1)取青藤碱作为对照品称定，加甲醇溶解制成浓度为1～2mg/ml的参照物溶液；(2)将10批芪麝丸制剂分别研细，称取1～2g加入容量瓶中，加入甲醇超声溶解，冷却后，加甲醇至刻度，过滤取滤液，即得供试品溶液；(3)吸取上述参照物溶液与供试品溶液各10-20μl，分别注入液相色谱仪检测得10批检测数据；色谱条件为：色谱柱：C18柱；流动相：0.2vol％甲酸水溶液和乙腈梯度洗脱；流速：0.8-1.5ml/min；测定波长：260-265nm；柱温：20-40℃；(4)根据上述检测数据，得到芪麝丸的高效液相图谱，确立高效液相色谱峰保留时间和峰面积值，然后计算各特征峰的相对保留时间的平均值和相对峰面积的平均值以及标准差，分别与参照峰的平均保留时间和平均峰面积相除，作为标准指纹图谱的相对峰保留时间和相对峰面积值，导出计算结果，制定标准指纹图谱数据，绘制标准指纹图谱；标准指纹图谱包含26个特征峰和1个参照峰；(5)将需要检测的样品按照步骤(1)和(2)分别制备参照物溶液和供试品溶液，并按照步骤(3)进行测定，将所得样品指纹图谱与标准指纹图谱比较，经计算相似度不低于0.90，即为合格的芪麝丸制剂。专利文献CN103472148A，公开日2013.12.25，公开了一种中药组合物制剂的指纹图谱检测方法，该方法包括：A、以酸水溶液(A)-乙腈(B)为流动相；采用梯度洗脱；检测波长190nm-290nm；B、取中药组合物制剂，用有机溶剂提取后制备成供试品溶液；以及C、取供试品溶液注入高效液相色谱仪，照高效液相色谱法测定，得到指纹图谱；其中，所述中药组合物制剂原料药组成为：牛黄50-200重量份、水牛角100-300重量份、麝香(或人工麝香)10-50重量份、珍珠20-100重量份、朱砂50-200重量份、雄黄50-200重量份、黄连50-200重量份、黄芩50-200重量份、栀子50-200重量份、郁金50-200重量份、冰片10-50重量份。专利文献CN104155371A，公开日2014.11.19，公开了一种治疗糖尿病中药复方制剂消渴丸HPLC指纹图谱的建立方法，所述消渴丸包括中药葛根、地黄、玉米须、天花粉、黄芪、南五味子、山药、化学药格列本脲，其特征在于，包括以下步骤：(1)、对照品溶液的制备：精密称取3’-羟基葛根素、葛根素、3’-甲氧基葛根素、大豆苷元-8-C-芹糖(1→6)葡萄糖、大豆苷、大豆素、五味子酯甲、五味子甲素，分别加入甲醇溶解各稀释成浓度为0.01～0.1mg/mL的溶液，滤过，即得；(2)、供试样品的制备：精确称取消渴丸细粉，加入85-95％乙醇，加热回流，冷至室温，过滤，浓缩，然后用40-60％甲醇溶解并定容，摇匀，滤过，即得；(3)、高效液相色谱法测定：将步骤(2)的供试样品进行高效液相色谱法测定，色谱条件为：色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶柱；柱温：20-50℃；流动相：流动相A为甲醇，流动相B为甲酸体积百分比为0.01％-0.1％的甲酸-水溶液，梯度洗脱；检测波长：235-280nm。