[发明专利]香蕉枯萎病抗性分子标记及其应用有效
| 申请号： | 201711087768.7 | 申请日： | 2017-11-07 |
| 公开（公告）号： | CN107653335B | 公开（公告）日： | 2021-04-13 |
| 发明（设计）人： | 王芳;夏玲;吕顺;胡贝;曾莉莎;刘建平 | 申请（专利权）人： | 东莞市香蕉蔬菜研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/6895 | 分类号： | C12Q1/6895;C12N15/11 |
| 代理公司： | 广州三环专利商标代理有限公司 44202 | 代理人： | 张艳美;郝传鑫 |
| 地址： | 523000 广*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 香蕉 枯萎病 抗性 分子 标记 及其 应用 | ||
1.一种鉴定香芽蕉香蕉枯萎病抗性的SCAR分子标记，其特征在于：所述SCAR分子标记的核苷酸序列如SEQ ID: 4所示，为296bp；所述SCAR分子标记来源于如SEQ ID: 1所示为384bp的SRAP分子标记；用于扩增所述SCAR分子标记的SCAR引物的核苷酸序列如SEQ ID: 2和SEQ ID: 3所示。
2.一种鉴定香牙蕉香蕉枯萎病抗性或筛选抗香蕉枯萎病的香牙蕉的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒包括如权利要求1所述的SCAR引物。
3.如权利要求1所述SCAR引物在制备鉴定香芽蕉香蕉枯萎病抗性或筛选抗香蕉枯萎病的香牙蕉的试剂盒中的应用。
4.如权利要求1所述SCAR分子标记、如权利要求1所述SCAR引物在鉴定香牙蕉香蕉枯萎病抗性或筛选抗香蕉枯萎病的香牙蕉中的应用。
5.一种鉴定香牙蕉香蕉枯萎病抗性或筛选抗香蕉枯萎病的香牙蕉的方法，其特征在于，所述方法包含以下步骤：
（1）提取所述香牙蕉叶片DNA；
（2）以所述香牙蕉叶片DNA为模板，用如权利要求1所述SCAR引物进行PCR扩增反应；
（3）检测扩增产物，具体表现为检测296bp特异性条带的有无，若检测到所述的296bp特异性条带，则香蕉枯萎病抗性为感病，若未检测到所述的296bp特异性条带，则香蕉枯萎病抗性为抗病。
6.如权利要求5所述的鉴定香芽蕉香蕉枯萎病抗性或筛选抗香蕉枯萎病的香牙蕉的方法，其特征在于：所述的PCR扩增反应体系为：20μl的反应体系含有含Mg2+的10×PCR buffer为2μl，2.5nM的dNTPs为2μl，10μM所述SCAR引物分别1μl，50ng/L 所述香牙蕉叶片DNA为1μl及5U/μl的TaqDNA聚合酶0.3μl，灭菌的ddH2O 12.7μl；所述的PCR扩增反应程序为：94℃预变性5 min；94℃变性30s，60℃退火30s，72℃延伸45s ，循环35次；72℃延伸10min。
7.如权利要求5所述的鉴定香芽蕉香蕉枯萎病抗性或筛选抗香蕉枯萎病的香牙蕉的方法，其特征在于：所述检测扩增产物的方法为采用1.2％的琼脂糖凝胶，110v电压电泳25分钟，在凝胶成像仪观察。
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