[发明专利]一种培养基套盒及其在单叶蔓荆离体快速繁殖中的应用

说明书

本发明公开了一种培养基套盒及其在单叶蔓荆离体快速繁殖中的应用。本发明培养基套盒包括用于建立无菌体系的培养基、用于丛芽诱导与增殖的培养基、用于不定芽诱导的培养基、用于不定芽伸长诱导的培养基、用于生根的培养基，以及体积比为3：1的黄泥和泥炭土混合而成的基质。本发明首次发现带芽茎段扁平化诱导的不定芽发生途径并通过本发明培养基套盒进行单叶蔓荆的离体培养，丛芽繁殖倍率最高可达21.9、平均每个扁平化外植体的不定芽发生数量最高达84.9个、不定芽伸长可达3.0cm、生根率与平均生根数分别可达70.5％与86.4、移栽30天后成活率最高可达86％，具有良好的应用前景。

技术领域

本发明属植物离体快速繁殖技术领域，更具体地说，本发明涉及一种用于单叶蔓荆丛芽诱导与扁平化茎段上形成不定芽再生途径的离体快速繁殖的培养基套盒及方法。

背景技术

单叶蔓荆(Vitex rotundifolia L.)是马鞭草科牡荆属落叶小灌木。广泛分布于热带、亚热带地区的沙滩，海边以及湖畔等地的荒洲上，其适应能力强，对环境要求不严格并具有耐碱、耐高温等特性，可作为海滨沙地、风口地段固沙造林的先锋植被。单叶蔓荆还具有较高药用价值，其果实是我国常用中药“蔓荆子”的来源之一，具有疏散风热，清利头目的功效。现代药理研究表明，蔓荆子具有莰烯、蒎烯、黄酮类、紫花牡荆素和木犀草素等化学成分具有明显地镇痛、抗炎、降压、抗肿瘤以及抗衰老等作用。且其茎条还可以用于箩筐的编制，花可提取香气等。

随着近年来蔓荆子新用途和新产品的开发利用，其市场需求量日益增加。导致其资源日益枯竭。在《国家重点保护野生药材物种名录》中，单叶蔓荆已被列为国家Ⅲ级濒危保护植物。目前，国内外对于蔓荆子的研究主要集中在化学成分和药理作用方面，在人工保护繁殖的研究较少。单叶蔓荆的繁殖方法主要有种子繁殖、扦插繁殖、分株繁殖、压条繁殖以及非试管营养器官快速育苗等。目前并无单叶蔓荆组织培养快繁的报道。

发明内容

本发明的目的在于：克服现有技术中缺乏对单叶蔓荆的人工繁殖方法等问题，提供了一种以单叶蔓荆带腋芽茎段为外植体，探讨不同浓度、种类的植物生长调节剂及其组合对其丛生芽诱导、茎段偏平化诱导与不定芽发生、不定芽伸长以及生根的影响，建立了高效的单叶蔓荆组培苗快繁技术体系。

为了实现上述发明目的，本发明提供了一种用于建立无菌体系的培养基，其是以MS培养基为基础培养基，添加了25～35g/L蔗糖和6.5～7.5g/L琼脂。

作为本发明用于建立无菌体系的培养基的一种优选技术方案，蔗糖的添加量为30g/L，琼脂的添加量为7g/L。

本发明还提供了一种用于丛芽诱导与增殖的培养基，其是以用于建立无菌体系的培养基为基础培养基，添加了0.5～2.5mg/L 6-苄基腺嘌呤。

本发明还提供了一种用于不定芽诱导的培养基，其是以用于建立无菌体系的培养基为基础培养基，添加了2.5mg/L 6-苄基腺嘌呤。

本发明还提供了一种用于不定芽伸长诱导的培养基，其是以用于建立无菌体系的培养基为基础培养基，添加了1.5～2.5mg/L萘乙酸。

本发明还提供了一种用于生根的培养基，其是以1/2MS培养基为基础培养基，添加了3.0mg/L吲哚丁酸、2.0～3.0mg/L萘乙酸、25～35g/L蔗糖和6.5～7.5g/L琼脂。

BA，即6-苄基腺嘌呤，是一种广泛使用的添加于植物生长培养基的细胞分裂素，具有抑制植物叶内叶绿素、核酸、蛋白质的分解，保绿防老；将氨基酸、生长素、无机盐等向处理部位调运等多种效能，广泛用在农业、果树和园艺作物从发芽到收获的各个阶段；在植物的离体快繁中可促进细胞分裂和由愈伤组织或器官上分化不定芽，同时有助于使腋芽由顶端优势的抑制下解放出来。

NAA，即萘乙酸，是一种广谱型植物生长调节剂，在植物离体培养过程中用于诱导细胞的分裂和根的分化，同时可影响茎和节的伸长、向性、顶端优势、叶片脱落等现象。