[发明专利]一种石斛多倍体专用培养基及其制备方法

说明书

技术领域：

本发明涉及培养基技术领域，具体涉及一种石斛多倍体专用培养基及其制备方法。

背景技术：

石斛中含有石斛多糖、生物碱、鼓槌菲和毛兰素等化合物，以及7种人体必需氨基酸和多种微量元素，具有抗肿瘤、抗衰老、增强免疫力等功能，对心血管、消化系统、呼吸系统和眼科疾病均有明显的治疗作用。目前石斛多倍体主要采用离体培养条件下，诱导体细胞染色体加倍的方式获得。通过基因组三倍化，可以获得具有多倍体和杂交种双重优势的三倍体，提高石斛的药材产量、品质和抗逆性。

近年来，石斛多倍体的人工培育方法由于没有专用的培养基，仍然存在种苗扩繁速度慢、组培苗炼苗及移栽成活率低等问题，严重制约了石斛多倍体的产业化、规模化发展。

发明内容：

本发明所要解决的技术问题在于提供一种石斛多倍体专用培养基及其制备方法，该培养基营养丰富，制备简单，不含化学成分的植物激素，使得石斛多倍体的增殖系数高、生长速度快、移栽成活率高。

本发明所要解决的技术问题采用以下的技术方案来实现：

一种石斛多倍体专用培养基，包括以下重量份的组分：泥炭藓100～160份、淤泥40～60份、改性高岭土15～30份、植物材料16～30份、EDTA二钠10～22份、硫酸铁3～8份、硫酸铵3～8份、硫酸钾5～12份、七水硫酸镁3～6份、无水磷酸二氢钾2～5份、葡萄糖3～7份、蛋白胨5～10份、西红柿汁6～16份、玫瑰花水3～8份、琼脂4～8份、活性炭8～15份、水20～36份。

优选地，所述淤泥为污水处理厂污泥、水体富营养河道底泥、水体富营养湖泊底泥底泥中的一种或多种的组合。

优选地，所述植物材料为农作物秸秆、松针、枯枝败叶中的一种或多种的组合。

优选地，所述改性高岭土是由20～30重量份的高岭土浸泡于250～400重量份的5～8wt％的盐酸溶液中，离心分离5～10min后，过滤干燥得到。

上述石斛多倍体专用培养基的制备方法，包括以下步骤：

1)将泥炭藓、改性高岭土、植物材料混合，干燥至含水量小于5％，粉碎成粒径小于3mm的混合颗粒；

2)将混合颗粒、淤泥充分混合均匀，120～150℃烘干至孔隙率达到50～80％，自然降至室温备用；

3)将步骤2)的混合物与EDTA二钠、硫酸铁、硫酸铵、硫酸钾、七水硫酸镁、无水磷酸二氢钾、葡萄糖、蛋白胨、西红柿汁、玫瑰花水、琼脂、活性炭、水混合搅拌均匀，紫外灭菌后得到所述专用培养基。

优选地，所述步骤2)制得的混合物粉碎至粒径1～3mm。

本发明的有益效果是：1、本发明的石斛多倍体专用培养基，以富含微量元素、矿物质且储水性能优良的泥炭藓为主要成分，配合改性高岭土、植物材料作为基质主体，透气多孔，不易板结；配合其他多种氮磷钾盐、缓冲剂、糖类、蛋白质类的添加剂，营养搭配均衡，符合石斛多倍体的生长需求，不含化学成分的植物激素，使得石斛多倍体的增殖系数高、生长速度快、移栽成活率高。

2、本发明的培养基中的活性炭具有良好的吸附性能，巨大的表面积和复杂的孔隙结构，能够去除色度、臭味、有毒金属，为石斛多倍体的成长提供了绿色环保的基质环境；玫瑰花水含有多种蛋白质、鞣质、环肽等有效成分，有利于提高培养基的杀菌抑菌性能、活性。

具体实施方式：

为了使本发明实现的技术手段、创作特征、达成目的与功效易于明白了解，下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。

实施例1

一种石斛多倍体专用培养基，包括以下重量份的组分：泥炭藓135份、污水处理厂污泥45份、改性高岭土23份、农作物秸秆22份、EDTA二钠15份、硫酸铁6份、硫酸铵5份、硫酸钾7份、七水硫酸镁4份、无水磷酸二氢钾3份、葡萄糖5份、蛋白胨8份、西红柿汁11份、玫瑰花水6份、琼脂5份、活性炭13份、水25份。其中，改性高岭土是由23重量份的高岭土浸泡于286重量份的6wt％的盐酸溶液中，离心分离8min后，过滤干燥得到。

上述石斛多倍体专用培养基的制备方法，包括以下步骤：

1)将泥炭藓、改性高岭土、植物材料混合，干燥至含水量小于5％，粉碎成粒径小于3mm的混合颗粒；

2)将混合颗粒、淤泥充分混合均匀，136℃烘干至孔隙率达到65％，自然降至室温，粉碎至粒径1～3mm备用；