[发明专利]一种处理含哌虫啶农药废水的曲霉属真菌包埋制剂

权利要求书

1.一种处理含哌虫啶农药废水的曲霉属真菌包埋制剂，其特征在于，成分包括：曲霉属真菌的菌液A、载体介质溶液B，载体介质溶液B与曲霉属真菌的菌液A的体积比为1:2，菌种浓度均为10- 20g/L；其中，载体介质与去离子水的质量体积比为 10:100 ～ 50:100，载体介质按重量份包括海藻酸钠40-50、膨胀石墨30-40、海藻酸钙凝胶10-15、琼脂6-10、聚乙烯醇10-12、聚丙烯酰胺6-8。

2.根据权利要求1所述的处理含哌虫啶农药废水的曲霉属真菌包埋制剂，其特征在于，所述制剂的制作过程为：

步骤a，驯化初级菌液的制备；

取500ml三角瓶，每瓶装驯化培养液150ml ；灭菌后在30±1℃和无菌条件下，向每个三角瓶中接入曲霉属真菌 1g，将三角瓶密封，放入回旋式摇床中培养，转速 90-110rpm，温度 30±1℃，培养 45 小时结束即可获得驯化初级菌液；

步骤b，一级种子液的制备：

取250ml三角瓶，每瓶装培养液100ml，灭菌后在30℃±1℃和无菌条件下，每个三角瓶接入步骤a中获得的驯化初级菌液 10ml，将三角瓶密封，放入回旋式摇床中培养，转速每分钟 120-130 转，温度 30℃ -32℃，培养 25-30 小时既得一级种子液；

步骤c，种子罐培养菌种液的获得；

将种子罐培养液加入到已经灭菌的种子罐中，然后通入蒸气加热，利用夹层蒸气加热到 90℃-95℃时改用直接蒸气加热，当种子罐中蒸气压力达到 0.11-0.12 兆帕时，保温 25-30 分钟即可达到灭菌效果；然后关闭蒸气，待种子罐降温至 28℃ -30℃之间时，将步骤b中获得的一级种子液按照种子罐培养液重量 1% 的用量加入到种子罐中，然后盖好接种帽，开始无菌空气通风发酵，无菌空气用量为每 100 公斤培养液每分钟用无菌空气 0.05-0.1 立方，pH 值自然，转速每分钟 120-130 转，发酵时间为 25-30 小时，检测 OD 值应达 到 0.1 毫升，OD600mm ＝ 1 即可停止发酵，获得种子罐培养菌种液；

步骤d，发酵罐培养:按照重量份称取载体介质，并加入300ml去离子水内，与发酵罐培养液混合，将发酵罐培养液加入到已经灭菌的发酵罐中，通入蒸气加热，当发酵罐中蒸气压力达到 0.11-0.12 兆帕时，温度 121℃-122℃时，保温 30-35 分钟即可达到灭菌效果；然后向夹层通入自来水降温，当罐中温度降到 30℃ -31℃时，无菌条件下接入发酵罐培养液重量3%的步骤c中获得的种子罐培养菌种液；接种时：首先提高种子罐的罐压力，达到0.3兆帕，发酵罐罐压维持在 0.2兆帕，打开接种管道的阀门将种子罐的菌种液直接输送到发酵罐中去，输送到上述定量的菌液后关闭接种管道阀门开始发酵；发酵温度 30℃ -31℃，转速每分钟 150 转，通风量每 100 公斤发酵液每分钟通入无菌空气 0.1 立方米，pH 自然，发酵时间 25-30 小时，检测 OD 值应达到 0.1 毫升，OD600mm ＝ 1 为合格，将液体蒸发可得固定化球体颗粒。

3.根据权利要求2所述的处理含哌虫啶农药废水的曲霉属真菌包埋制剂，其特征在于，在上述步骤a中，所述的驯化培养液为：牛肉膏4g，碳酸钙30g，磷酸二氢钙25g，玉米粉10g，无水氯化钙0.3g，磷酸二氢钾 0.25g，玉米浆干粉 5g，葡萄糖 15g，加水 1000ml 后混合均匀既得。

4.根据权利要求2所述的处理含哌虫啶农药废水的曲霉属真菌包埋制剂，其特征在于，在上述步骤b中，所述的培养液中各组分的重量百分比为 ：酪蛋白胨 5％，牛肉膏 5％，碳酸钙 3％，磷酸氢钙 2％，玉米粉 2％，磷酸二氢钾 0.3％，玉米浆干粉 0.4％，葡萄糖 2.3％，水 80％。

5.根据权利要求2所述的处理含哌虫啶农药废水的曲霉属真菌包埋制剂，其特征在于，在上述步骤c中，所述的种子罐培养液中各组分的重量百分比为：酪蛋白胨 3％，牛肉膏 3.5％，葡萄糖 0.5％，酵母膏 3％，碳酸钙 2％，磷酸氢钙 1％，玉米粉 1％，磷酸二氢钾 0.2％，玉米浆干粉 0.2％，水 85.6% 。

6.根据权利要求2所述的处理含哌虫啶农药废水的曲霉属真菌包埋制剂，其特征在于，在上述步骤d中，所述的发酵罐培养液中各组分的重量百分比为：酪蛋白胨 4％，牛肉膏 3％，酵母膏 2.5％，葡萄糖 3％，碳酸钙 5％，磷酸氢钙 3.5％，玉米粉 3％，磷酸二氢钾 0.3％，玉 米浆干粉 0.7％，乳酸钠 2％，水 73％。 上述接种过程中，通过高压作用于载体介质与菌种，实现菌种压缩于载体介质的表面积内部空间内。