[发明专利]一种脐带血造血干细胞的扩增方法

说明书

技术领域

本发明属于细胞技术领域，具体涉及一种脐带血造血干细胞的扩增方法。

背景技术

在1950s，Thomas等发现骨髓来源的造血干细胞(Hematopoietic stem cell,HSC)可重建造血系统，从而治愈包括白血病、多发性骨髓瘤(MDS)等多种恶性血液疾病，随后在世界范围内HSC的临床治疗广泛开展，随着医学的发展，细胞生物学、分子生物学领域的研究不断深入，HSC的临床适应症不断被发现，HSC的医学价值愈加彰显。

目前HSC的来源有三种，1956年Thomas进行首例HSC移植使用的是成人骨髓(Bone marrow,BM)来源的HSC；1989年，Gluckman和Kurtzberg合作进行了首次脐带血(Umbilical cord blood,UCB)来源的HSC移植治疗；除此之外还有外周血(Peripheral blood,PB)HSC。

由于BM-HSC和PB-HSC的采集都需要从人体中直接抽取，抽取前需要对供者先进行复杂的预处理和动员过程，因此对供者，无论是异体和自体都有直接的伤害，尤其对处于治疗阶段的自体供者。而脐带血造血干细胞(UCB-HSC)的采集过程完全不会对供者造成任何伤害，步骤简单且迅速，具有BM-HSC和PB-HSC无可比拟的优点，这也是UCB-HSC在世界范围内广泛用于临床治疗的重要原因之一。

目前UCB-HSC的临床适应症已超过40种，包括：白血病、再生障碍性贫血、多发性骨髓瘤、地中海贫血等血液疾病，以及WAS综合征等遗传性代谢疾病和某些实体瘤，具有极其重要的医学价值。由于脐带血是在婴儿成功分娩结扎脐带后，从脐静脉中抽取的，相对于骨髓来源的造血干细胞，脐带血可抽取的体积确实相对较少，于是普遍被误会，认为脐带血来源的造血干细胞只能用于体重小的患者(主要是儿童)，这种误会制约着UCB-HSC的临床应用发展。其实对于造血干细胞的移植和输注治疗，最重要的参数是总有核细胞数(Total nuclear cells,TNC)以及CD34⁺细胞比例，二者的乘积为CD34⁺细胞总数，也就是HSC的总数，只要HSC总数满足临床要求，UCB-HSC同样可以用于成人患者。

由于采集方便安全以及对供者不会造成任何伤害，UCB-HSC有着其他来源HSC无可比拟的优点，所以如果能在体外扩增HSC从而提高HSC的总数，将会极大消除一直以来对UCB-HSC的误会，使UCB-HSC具有广泛的认知，从而救助更多患者，并相对减少BM-HSC和PB-HSC供者，从而减少社会的医疗负担。

HSC扩增方面的研究，目前常用的扩增方法是通过细胞因子的组合实现的，如：IL-3、IL-6、FLT-3、TPO等。单纯的细胞因子组合的扩增体系已被世界上许多实验室采用多年，尽管不同的实验室会采用不同的组合方式，而对于扩增的结果，有的提高了HSC细胞数量，有的则提高了CD34⁺细胞比例，均没有突破性成果。因此，单纯的细胞因子组合的扩增体系，无论在HSC最终生成数量还是CFU-GM集落形成能力上均已遇到瓶颈，这对于未来UCB-HSC的更广泛使用，并没有突破性的支持。因此，探索新的更高效的扩增方法对于将来UCB-HSC更广泛的运用具有实质性的意义。

发明内容

为了克服现有技术的缺点与不足，本发明提供了一种脐带血造血干细胞的扩增方法；本发明提供了QS11的一种用途；本发明提供了一种细胞扩增培养基。

本发明所述QS11是一种小分子化合物，中文名为：(BETAS)-BETA-[[9-([1,1'-联苯]-4-甲基)-2-[(2,3-二氢-1H-茚-5-基)氧基]-9H-嘌呤-6-基]氨基]苯丙醇；分子式为：C36H33N5O2；分子量为：567。

为了实现上述目的，本发明提供了一种细胞扩增培养基：

一种细胞扩增培养基，所述细胞扩增培养基中添加有小分子化合物QS11。

作为对上述技术方案的进一步改进，所述QS11在细胞扩增培养基中的浓度为0.25～4μmol/L；优选地，QS11在细胞扩增培养基中的浓度为1μmol/L。

作为对上述技术方案的进一步改进，所述的QS11的纯度≥99％，GC。

作为对上述技术方案的进一步改进，所述细胞扩增培养基中还含有细胞因子，所述细胞因子为IL-6、IL-3、TPO、SCF、FLT-3中的至少一种。