[发明专利]一组用于评估胶质母细胞瘤预后的联合蛋白及其应用

说明书

本发明涉及医学生物检测技术领域，提供了WDR1、NMI以及LIN28蛋白的新用途，具体是在制备脑胶质母细胞瘤预后评估试剂盒中的应用，本发明进一步提供了一种采用免疫组化方法针对WDR1、NMI以及LIN28蛋白的定量检测来进行脑胶质母细胞瘤预后评估的试剂盒和检测方法。本发明利用免疫组化技术、系统评分测定脑胶质母细胞瘤组织中WDR1、NMI和LIN28蛋白的表达水平，并结合术后随访信息，确定WDR1、NMI、LIN28蛋白表达水平与手术后脑胶质母细胞瘤患者预后存在相关性，WDR1、NMI和LIN28蛋白联合能用于制备判断脑胶质母细胞瘤患者预后的蛋白分子标记，对于脑胶质母细胞瘤的分子分型、病人术后监控和序贯治疗也具有重要的指导意义。

技术领域

本发明涉及医学生物检测技术领域，涉及WDR1、NMI和LIN28三种蛋白的新的用途，具体为WDR1、NMI和LIN28蛋白联合在制备脑胶质母细胞瘤预后评估试剂盒中的应用。

背景技术

脑胶质瘤是中枢神经系统最常见的原发肿瘤，按病理及临床特点可分为I至IV级，其中胶质母细胞瘤(GBM)是脑胶质瘤中恶性程度最高的亚型。由于胶质母细胞瘤侵袭性生长，近年来尽管在以标准化治疗为基础的多重治疗方面取得了一些进展，但胶质母细胞瘤患者的总体预后仍未有明显改善，其中位生存期只有14-16个月。

胶质母细胞瘤患者预后取决于某些临床因素，如发病年龄、KPS评分、手术切除程度、病理类型等。当前，胶质母细胞瘤诊断仅以形态学为基础，难以客观全面地反应肿瘤的生物学行为特征，不能准确判断患者预后和指导术后临床治疗。因此，寻找能够更加有效区分胶质母细胞瘤分子亚型及准确判断预后的相关基因/蛋白，筛选出高位患者，指导临床治疗，是本发明的基础出发点。

前期发明人基因芯片对14例不同级别胶质瘤组织进行表达谱检测，根据患者预后好和差(以60个月为界限)分为两组，筛选出72个差异表达基因(表达值相差2倍以上，p0.001)，其中包括WDR1、NMI、LIN28、EMP3、CDK2等。进一步，通过对TCGA数据库的分析发现WDR1、NMI、LIN28的mRNA表达水平与胶质母细胞瘤患者预后相关。

WDR1是一高度保守的蛋白，广泛表达与真核细胞，参与肌动蛋白丝分解，在有丝分裂及细胞迁移中发挥重要作用，而此类功能也是恶性肿瘤增殖侵袭的重要生物学基础。已有文献报道WDR1在多种肿瘤如乳腺癌、甲状腺癌、宫颈癌等中表达明显上调，参与肿瘤恶性进程。

NMI作为致癌基因NMYC和CMYC的互作因子，已被发现参与多种细胞信号通路如JAK/STAT等，而该通路可促进肿瘤增殖侵袭，调节肿瘤免疫和微环境等。但NMI本身在肿瘤中的表达及作用机制研究较少。

LIN28被发现是一RNA结合蛋白，可与miRNA let-7前体结合阻止其成熟过程，而RAS，CMYC等多种致癌基因均受let-7负性调控，抑制let-7被证明与多种肿瘤如肺癌、宫颈癌、肝癌等有关，研究证实LIN28在此类肿瘤中表达明显升高，并与患者较差预后密切相关。

在此基础上，本发明前期研究通过组织芯片对WDR1、NMI、LIN28在胶质母细胞瘤中蛋白表达水平进行验证，发现WDR1、NMI、LIN28均在胶质母细胞瘤中高表达，并与患者不良预后密切相关。

虽然上述每种蛋白均具有预测胶质母细胞瘤预后的潜力，但把三种蛋白联合起来预测胶质母细胞瘤患者的预后则具有更强的判断效能。

目前尚无WDR1、NMI、LIN28蛋白应用于脑胶质母细胞瘤的文献报道。

发明内容

本发明的目的在于提供一种脑胶质母细胞瘤的预后评估标志物，本发明的目的也在于提供WDR1、NMI以及LIN28蛋白的新用途，即在脑胶质母细胞瘤预后评估试剂盒中的应用。