[发明专利]一种家畜外周血来源巨噬细胞分离与培养的试剂盒有效
| 申请号： | 201711077978.8 | 申请日： | 2017-11-06 |
| 公开（公告）号： | CN107630000B | 公开（公告）日： | 2021-07-13 |
| 发明（设计）人： | 韩红兵;刘永晓;刘哲熹;连正兴 | 申请（专利权）人： | 中国农业大学 |
| 主分类号： | C12N5/0786 | 分类号： | C12N5/0786 |
| 代理公司： | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人： | 关畅;何叶喧 |
| 地址： | 100193 *** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 家畜 外周血 来源 巨噬细胞 分离 培养 试剂盒 | ||
【权利要求书】：
1.一种制备巨噬细胞的方法，包括如下步骤：
（a）将离体外周血、Hank's溶液和外周血淋巴细胞分离液混合，收集外周血单个核细胞；
（b）采用巨噬细胞培养液培养步骤（a）得到的外周血单个核细胞，得到巨噬细胞；
所述步骤（b）包括如下步骤：采用巨噬细胞培养液培养所述外周血单个核细胞24h，弃去悬浮细胞，PBS溶液洗涤贴壁细胞，在巨噬细胞培养液中培养，每隔3-4天更换新的巨噬细胞培养液，连续培养7-10天，得到巨噬细胞；
所述巨噬细胞培养液由胎牛血清和RPMI-1640培养基组成；胎牛血清在巨噬细胞培养液中的体积百分含量为10%；
所述步骤（a）中，所述离体外周血、Hank's溶液和外周血淋巴细胞分离液的体积配比关系为1:1:2。
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