[发明专利]检测果蔬中邻苯基苯酚的时间分辨荧光免疫试剂盒及其检测方法在审
| 申请号： | 201711073738.0 | 申请日： | 2017-11-05 |
| 公开（公告）号： | CN109752522A | 公开（公告）日： | 2019-05-14 |
| 发明（设计）人： | 杜霞;洪霞;秦悦 | 申请（专利权）人： | 镇江华维检测技术有限公司 |
| 主分类号： | G01N33/533 | 分类号： | G01N33/533;G01N33/558;G01N33/577 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 212009 江苏省*** | 国省代码： | 江苏;32 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 检测 邻苯基苯酚 制备 荧光免疫分析试剂 时间分辨荧光免疫分析 时间分辨荧光免疫 单克隆抗体 多孔包被板 抗体冻干品 羊抗鼠抗体 样品前处理 检测试剂 特异性强 现场操作 灵敏度 包被原 标准品 缓冲液 免疫原 前处理 试剂盒 洗涤液 增强液 种检测 铕标记 果蔬 荧光 回收率 分辨 应用 | ||
1.一种检测邻苯基苯酚的时间分辨荧光免疫分析试剂盒，其特征在于：由多孔包被板，缓冲液，邻苯基苯酚标准品，邻苯基苯酚的抗体冻干品，铕标记的羊抗鼠抗体，洗涤液和增强液所组成。
2.一种根据权利要求1所述检测邻苯基苯酚的时间分辨荧光免疫分析试剂盒的检测方法，包括免疫原、包被原和单克隆抗体的制备以及样品前处理，其特征在于：
将邻苯基苯酚与牛血清白蛋白偶联，得到免疫原；
将邻苯基苯酚与卵血清蛋白偶联，得到包被原；
用步骤(1)的免疫原免疫小鼠，通过杂交瘤技术，得到分泌抗邻苯基苯酚的单克隆抗体的杂交瘤细胞株；
以体内诱生腹水法大量制备抗体，使用Protein G柱进行纯化，获得抗邻苯基苯酚的单克隆抗体
用步骤(2)的包被原包被固相载体；
将动物组织先经过酸解提取后，再过MAX柱净化，最后加入衍生试剂和催化剂进行处理，得到待测产物；
将步骤(6)的待检物进行测量荧光强度cps，对照标准曲线计算样品中的邻苯基苯酚含量。
3.根据权利要求1所述检测邻苯基苯酚的时间荧光免疫分析法试剂盒的检测方法，其特征在于：所述的固相载体是多孔包被板，采用96孔的多微孔包被板作为固相载体。
4.根据权利要求1所述检测邻苯基苯酚的时间荧光分辨免疫分析法试剂盒的检测方法，其特征在于：所述的衍生试剂是丁胺。
5.根据权利要求1所述检测邻苯基苯酚的时间分辨荧光免疫分析法试剂盒的检测方法，其特征在于：所述的催化剂是腈基磷酸二乙酯。
6.根据权利要求1所述检测邻苯基苯酚的时间荧光免疫分析法试剂盒的检测方法，其特征在于：所述步骤(6)和(7)具体为取包被有邻苯基苯酚-OVA的微孔包被板，加入50 µL处理好的样品到各自的微孔中，加入50 µL以缓冲液稀释的邻苯基苯酚抗体，25~37℃振荡0.5~1小时，洗涤液洗三次，加以缓冲液稀释的100 µL Eu3+-羊抗鼠抗体，25~37℃振荡0.5~1小时，洗涤液洗六次，加200 µL增强液振荡5分钟后测量荧光强度cps，从标准曲线计算样品中的邻苯基苯酚含量。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于镇江华维检测技术有限公司，未经镇江华维检测技术有限公司许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201711073738.0/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
