[发明专利]一种川西獐牙菜不定根诱导方法

说明书

技术领域

本发明涉及植物不定根诱导技术领域，尤其是一种川西獐牙菜不定根诱导方法。

背景技术

川西獐牙菜(Swertia mussotii Franch)别名藏茵陈，为龙胆科(Gentianaceae)獐牙菜属Swertia L.二年生多分枝草本植物，主要生长于青藏高原。

川西獐牙菜全草入药，性寒、味苦，有清肝利胆、清热解毒、祛湿、消炎愈疮的功效，主治肝炎、退黄、退烧、流感、消化不良、胆囊炎、急性骨髓炎、急性结膜炎、急性咽喉炎及烫伤等，且无副作用，是一种十分珍贵的药用植物，是青藏高原中藏药八珍之一。但由于川西獐牙菜生长海拔高，采药高，种子小且有休眠期，种子萌发率低，而市场需求量大等原因，野生的川西獐牙菜资源十分匮乏。

利用不定根培养生产次生产物具有生长周期短、条件可控、来源单一、遗传背景一致、经济方便、重复性强、效率高和可周年试验或生长等优点，现阶段不定根培养技术已在人参、丹参、三七、苍术、太子参等多种药材中得以实现。

发明内容

本发明所要解决的技术问题在于提供一种川西獐牙菜不定根诱导方法。

为解决上述技术问题，本发明的技术方案是：

一种川西獐牙菜不定根诱导方法，步骤如下：

(1)川西獐牙菜愈伤组织诱导和继代：取长势良好的川西獐牙菜叶片，进行横切，将处理好的外植体放入川西獐牙菜愈伤组织诱导培养基中，培养条件为20摄氏度，光照16小时，黑暗8小时，14天后外植体膨大，30天后愈伤开始形成，挑选黄绿色紧实部分移至川西獐牙菜愈伤组织继代培养基上进行继代，20天后长出长势良好的愈伤组织；每15天继代一次愈伤组织；

(2)川西獐牙菜不定根诱导：将愈伤组织移至川西獐牙菜不定根诱导培养基中，培养条件同步骤(1)，20天后生出不定根；其中，

步骤(1)中所述川西獐牙菜愈伤组织诱导培养基的组成包括：MS培养基+2,4-D(0.5mg/L)+KT(0.5mg/L)，

所述MS培养基的配方如下：

大量元素：

微量元素：

铁盐：

有机物质：

琼脂 8g/L

pH 5.8-6.0

步骤(1)中所述川西獐牙菜愈伤组织继代培养基的组成包括：MS培养基+6-BA(2mg/L)，

所述MS培养基配方如下：

大量元素：

微量元素：

铁盐：

有机物质：

琼脂 8g/L

pH 5.8-6.0

步骤(2)中所述川西獐牙菜不定根诱导培养基为MS培养基，所述MS培养基配方如下：

大量元素：

微量元素：

铁盐：

有机物质：

琼脂 8g/L

pH 5.8-6.0。

本发明的有益效果是：

上述川西獐牙菜不定根诱导方法，通过对川西獐牙菜不定根诱导体系进行摸索，利用组织培养方法生产川西獐牙菜中有用次生代谢产物，具有不受时间、地点限制,可以提供均一产物等特点，为利用川西獐牙菜不定根进行次生代谢产物的合成奠定了理论和实践基础。

附图说明

图1：川西獐牙菜愈伤组织诱导14天后外植体膨大；

图2:川西獐牙菜愈伤组织继代培养20天后形成愈伤组织；

图3：川西獐牙菜愈伤组织于不定根诱导培养基上培养20天长出不定根。

具体实施方式

下述实施例中2,4-D为2,4-二氯苯氧乙酸，KT为激动素，6-BA为6-苄氨基腺嘌呤。

实施例1

一种川西獐牙菜不定根诱导方法，步骤如下：