[发明专利]一种在支原体液体培养时使标本均匀分散的方法

说明书

技术领域

本发明涉及生物检测技术领域，尤其涉及支原体液体培养、鉴定及药敏检测，具体为一种在支原体液体培养时使标本均匀分散的方法。

背景技术

支原体(Mycoplasma)是一种介于细菌和病毒之间、能独立生存的无细胞壁微生物，种类包括肺炎支原体、解脲脲原体、人型支原体、微小脲原体、和生殖器支原体等。其中，人型支原体和解脲脲原体是引起非淋球菌性泌尿生殖道炎的主要病原体，临床上可以表现为附睾炎、前列腺炎、精囊腺炎、盆腔炎和不孕不育等。支原体作为引起女性泌尿生殖道感染的主要病原体之一，还会导致妊娠期妇女生产出低体重儿、反复流产、绒毛膜羊膜炎、胎膜早破及死产等。

在目前的临床微生物检验工作中，绝大多数医院采用商品化试剂盒检测各种生殖道支原体，其基本原理是：支原体培养液中含有支原体生长所需的营养物质、抑菌剂、尿素、精氨酸和酚红指示剂等物质，培养时支原体分解尿素或精氨酸产碱而使培养液的pH升高，这样培养液中的酸碱指示剂——酚红会发生颜色改变。培养液因支原体生长而产生的颜色变化再结合药敏板上预制的多种抗生素，最后可以达到支原体培养、鉴定、计数和药敏检测的目的。

支原体液体培养时，首先将泌尿生殖道拭子样本接种在液体培养基中，然后再分别加入到鉴定、计数和药敏孔里。由于部分标本含有较多粘液或脓性分泌物，短时间内不能完全溶解于培养液中，故包裹其中的支原体不能完全释放到培养液中，这样使支原体在培养液中分布不均匀，当用微量加样器向每个鉴定药敏孔加入同体积培养液时，容易造成每孔中加入的支原体数量不同，最终导致一些错误结果的出现。

为了促进粘液或脓液中支原体的释放和培养液的均质化，有必要采用某种方法(物理、化学或生物方法)来加速泌尿生殖道标本的溶解，并开发出一种在支原体液体培养时使标本均匀分散的方法，以提高检测结果的准确性。

发明内容

有鉴于此，本发明所解决的技术问题在于提供一种在支原体液体培养时使标本均匀分散的方法，无需额外的操作步骤，即可使支原体液体培养物中支原体均匀分散，提高实验的可操作性以及药敏检测的结果的准确性。

为了解决上述技术问题，本发明所采用的技术方案如下：

一种在支原体液体培养时使标本均匀分散的方法，加入N-乙酰半胱氨酸水溶液到支原体液体培养物中。

优选地，加入到支原体培养液中的N-乙酰半胱氨酸终浓度为0.1％～1％。

优选地，加入的N-乙酰半胱氨酸水溶液原始工作浓度为10％～20％。

优选地，加入的N-乙酰半胱氨酸水溶液pH值为5～8。

优选地，加入的N-乙酰半胱氨酸水溶液用NaHCO₃进行pH值调节。

在本发明的实施方案中，取N-乙酰半胱氨酸(NAC)粉末和无菌水配制原始工作浓度为10％～20％的NAC(pH为5～8)，然后加入100μL NAC溶液到支原体培养液中使NAC终浓度为0.1％～1％。

相比于现有技术，本发明的的方法至少具备如下有益效果：

本发明的技术方案中，通过在支原体液体培养时，加入N-乙酰半胱氨酸水溶液到支原体液体培养物中，其中N-乙酰半胱氨酸(NAC)可消化分解泌尿生殖道标本中的粘液，从而使泌尿生殖道标本均匀分散在支原体培养液中，有利于标本中支原体均匀地加入到鉴定药敏板的各个孔内。本发明的方法不需要额外的操作步骤，即可达到标本均匀分散的良好效果，各孔的颜色观察也更容易，可避免不一致甚至矛盾结果的产生，鉴定药敏检测的结果更为准确。

附图说明

图1是未使用和使用NAC的结果比较图。图中有两列五排共10块鉴定药敏板，左列为未使用NAC处理的支原体鉴定药敏检测结果，右列为使用NAC处理后的支原体鉴定药敏检测结果，每排的两块鉴定药敏板均使用同一份泌尿生殖道拭子进行检测。结果显示，11号、17号和22号标本在使用NAC和未使用NAC时的结果一致，但22号标本的人型支原体(Mh)鉴定孔、红霉素(ERY)孔、阿奇霉素(AZI)孔和克拉霉素(CLA)孔的颜色非常浅，很容易被误判为阴性或敏感；14号标本在未使用NAC时红霉素(ERY)和交沙霉素(JOS)为敏感，但在使用NAC时红霉素和交沙霉素为中介；16号标本在未使用NAC时阿奇霉素(AZI)为敏感，但在使用NAC时阿奇霉素为中介。

具体实施方式