[发明专利]一种微孢根霉来源的β-甘露聚糖酶及其编码基因与应用

权利要求书

1.一种重组蛋白在制备魔芋甘露寡糖或决明子甘露寡糖中的应用，其特征在于，所述重组蛋白是由序列表中序列1自N末端第20至181位氨基酸残基的氨基末端添加了

MGSSHHHHHHSSGLVPRGSHMASMTGGQQMGRGS的蛋白质；

制备魔芋甘露寡糖的应用具体为：所述重组蛋白水解魔芋粉溶液，水解的pH值为5.0，水解的温度为50℃；

制备决明子甘露寡糖的应用具体为：所述重组蛋白水解决明子胶溶液，水解的pH值为5.0，水解的温度为50℃。

2.如权利要求1所述的应用，其特征在于：制备魔芋甘露寡糖的应用具体为：称取100mL蒸馏水，加入20g魔芋粉充分搅拌，按照与魔芋粉的比例分别为250U/g、500U/g、750U/g、1000U/g加入β-甘露聚糖酶，置于50℃下水解8h，酶解后沸水浴灭活20min，得到水解液，所得水解液于10000rpm离心10min后，收集上清液，即粗糖液，用3,5-二硝基水杨酸法测定粗糖液中还原糖的含量并计算还原糖得率，沉淀用纯水冲洗两遍后烘干称重，计算魔芋粉的水解率，

随着加酶量逐渐增大，魔芋粉的水解率逐渐升高，同时粗糖液中还原糖得率逐渐上升，魔芋粉经750U/g的β-甘露聚糖酶酶解8h后，魔芋粉的水解率为91.5%，粗糖液中还原糖得率为68.2%，随后加酶量的增大则无法明显提高魔芋粉的水解率和粗糖液的还原糖得率；

β-甘露聚糖酶为权利要求1所述的重组蛋白。

3.如权利要求2所述的应用，其特征在于：魔芋甘露寡糖中以质量百分比计，甘露二糖至甘露六糖含量为40%。

4.如权利要求1所述的应用，其特征在于：制备决明子甘露寡糖的应用具体为：称取100mL蒸馏水，加入10g决明子胶充分搅拌，按照与决明子胶的比例分别为250U/g、500U/g、750U/g、1000U/g加入β-甘露聚糖酶，置于50℃下水解8h，酶解后沸水浴灭活20min，得到酶解液，所得酶解液于10000rpm离心10min后，收集上清液，即粗糖液，用3,5-二硝基水杨酸法测定粗糖液中还原糖的含量并计算还原糖得率，沉淀用纯水冲洗两遍后烘干称重，计算决明子胶的水解率，

随着加酶量逐渐增大，决明子胶的水解率逐渐升高，同时粗糖液中还原糖得率逐渐上升，当加酶量达到750U/g决明子胶时，决明子胶的水解率为70.1%，粗糖液中还原糖得率为62.8%；当加酶量达到1000U/g决明子胶时，决明子胶的水解率为70.6%，粗糖液中的还原糖得率为63.9%；

β-甘露聚糖酶为权利要求1所述的重组蛋白。

5.如权利要求4所述的应用，其特征在于，决明子甘露寡糖中主要成分为甘露三糖、甘露四糖以及甘露五糖。