[发明专利]一种从金花葵中分离纯化金丝桃苷和异槲皮苷的方法

说明书

本发明涉及一种从金花葵中分离纯化金丝桃苷和异槲皮苷的方法，属于天然化合物提取和分离领域。方法如下：加热回流提取金花葵中黄酮；碱性条件下，锌盐与金花葵中除金丝桃苷和异槲皮苷外的黄酮类物质形成稳定络合物沉淀；离心去除络合物沉淀；浓缩上清液，获得高纯度的金丝桃苷和异槲皮苷。该方法可快速、高效、安全从金花葵中分离纯化金丝桃苷和异槲皮苷，有助于实现金丝桃苷和异槲皮苷的工业生产。

技术领域

本发明涉及一种从金花葵中分离纯化金丝桃苷和异槲皮苷的方法。具体地说，从金花葵提取液出发，利用金丝桃苷和异槲皮苷与锌盐络合能力较弱，其他黄酮类化合物与锌盐络合能力较强的特性，去除金花葵提取液中的其他黄酮类化合物，开发一种快速、高效、安全从金花葵中分离纯化金丝桃苷和异槲皮苷的方法。属于天然化合物提取和分离领域。

背景技术

金丝桃苷又名槲皮素-3-O-β-D-吡喃半乳糖苷，异槲皮苷又名槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷，两者都是槲皮素的糖苷,具有相同的苷元和相似的极性，仅在糖基部分有一个羟基的构型不同,前者是半乳糖苷,后者是葡萄糖苷,其余部分完全相同，属于黄酮醇苷类化合物。(复旦学报，2007，46，417-420)它们都广泛存在于各种植物体内，如连翘、黄蜀葵花、吴茱萸和罗布麻叶等，都是重要的天然产物。许多药理学研究表明，金丝桃苷具有改善心血管功能、脑缺血/再灌注损伤保护、抗氧化还原、抗炎、镇痛止咳、降压等作用(中国药房，2016，27，1415-1417)，异槲皮苷具有降血压、抗炎、抗抑郁等药理学活性(药学实践杂志，2011，29，272-274)。金丝桃苷的结构式如下式Ⅰ所示，异槲皮苷的结构式如下式Ⅱ所示。

金花葵(Hibiscus manihot L.)别名菜芙蓉、野芙蓉、黏干或山榆皮，为一年生草本锦葵科(Malvaceae)秋葵属植物，金花葵有“植物大熊猫”的美誉，含有多种植物生物活性物质，主要有黄酮类化合物、维生素 E、不饱和脂肪酸、膳食纤维和微量元素等(中国药物评价，2015，32，90-92)。近年，金花葵花作为提取黄酮类物质的重要来源受到各方关注。已有研究表明，金丝桃苷和异槲皮苷是金花葵花中的主要活性成分，其最高含量分别为1.59％和1.31％(北京中医药大学学报，2016，39，308-315)。

目前有很多关于分离纯化金丝桃苷和异槲皮苷的报道。比如，夏传海等(中国专利申请号 201210424557.9)利用三级串联的大孔树脂吸附洗脱的方式从罗布麻叶中同时制备金丝桃苷和异槲皮苷，纯度均达到90％-98％。付王杰等(中国专利申请号201110091575.1)利用大孔树脂吸附、硅胶柱层析的方式从鹿蹄草中纯化分离金丝桃苷，纯度可达到95％。这些方法都存在纯化方法繁琐、成本过高、生产周期长、难以工业生产等问题，限制了金丝桃苷和异槲皮苷的应用。

本发明从金花葵提取液出发，利用金丝桃苷和异槲皮苷与锌盐络合能力较弱，其他黄酮类化合物与锌盐络合能力较强的特性，去除金花葵提取液中的其他黄酮类化合物，开发一种快速、高效、安全从金花葵中分离纯化金丝桃苷和异槲皮苷的方法。

发明内容

本发明的目的是利用金丝桃苷和异槲皮苷与锌盐络合能力较弱，其他黄酮类化合物与锌盐络合能力较强的特性，去除金花葵提取液中的其他黄酮类化合物，开发一种快速、高效、安全的分离纯化金花葵中的金丝桃苷-异槲皮苷组合物的方法。

本发明的目的是由以下技术方案实现的：

一种从金花葵提取液出发，利用金花葵中黄酮类物质与锌盐络合能力强弱不同，开发一种快速、高效、安全的分离纯化金花葵中的金丝桃苷和异槲皮苷的方法。其步骤如下：

A.精密称取5.0g干燥金花葵花粗粉末，在温度80℃的条件下，用70％的乙醇溶液加热回流提取3h，冷却至室温后抽滤，得到金花葵残渣和上清液，收集上清液，用70％的乙醇溶液定容到250mL容量瓶中即得样品溶液；