[发明专利]改进空隙及孔隙促进细胞黏附率的复合支架及制备方法

权利要求书

1.一种改进空隙及孔隙促进细胞黏附率的复合支架，其特征在于，所述改进空隙及孔隙促进细胞黏附率的复合支架通道孔及球形孔分别为150μm至650μm和3μm至15μm；壳聚糖：羟基磷灰石质量比为7：3。

2.一种如权利要求1所述改进空隙及孔隙促进细胞黏附率的复合支架的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括以下步骤：

通过原位杂交技术及冻干方法获得孔及球形孔的CS/HA支架；

通过氢键连接CS和RGD肽，通过静电自主装法将RGD多肽修饰在CS/HA支架孔道表面，制备含有RGD肽的CS/HA高效粘附细胞的三维多空支架。

3.如权利要求2所述改进空隙及孔隙促进细胞黏附率的复合支架的制备方法，其特征在于，通过改进空隙及孔隙促进细胞黏附率的复合支架与MSCs体外复合细胞培养，评价改进空隙及孔隙促进细胞黏附率的复合支架对于MSCs细胞的短期粘附率，细胞与改进空隙及孔隙促进细胞黏附率的复合支架支架的粘附微观形态的影响。

4.如权利要求2所述改进空隙及孔隙促进细胞黏附率的复合支架的制备方法，其特征在于，将RGD多肽修饰在CS/HA支架孔道表面后，通过PicoGreen细胞繁殖定量检测RGD/CS/HA材料上的细胞生长。

5.如权利要求2所述改进空隙及孔隙促进细胞黏附率的复合支架的制备方法，其特征在于，原位杂交法CS/HA支架的制备包括：

将一定重量的Ca(NO₃)₂·4H₂O和KH₂PO₄添加到体积比为2％的乙酸溶液中混合；然后应用磁力搅拌器搅拌3h直至沉积的钙盐完全溶解，配制成HA前驱体溶液；调整液体pH值至4.0；

然后将CS粉末添加到溶液中，在室温下应用磁力搅拌器搅拌4小时，得到质量比为4％CS溶液，然后4％CS溶液将转移到干净的烧杯中，静置24h脱泡，形成CS与HA均匀一致的凝胶棒的前驱体溶液；

然后取2ml CS溶液注入模具中先形成一层凝固的CS膜，再将已静置好的壳聚糖与羟基磷灰石前驱体溶液10毫升注入模具内表面铸造造模，室温下静置12h后将造模浸入5wt％氢氧化钠溶液浸泡，形成水凝胶；将水凝胶棒用去离子水冲洗至pH值在7，然后置于60℃烘箱中空气干燥8-10h；凝胶棒逐渐变为直径10mm时停止烘干，将凝胶棒放入冷冻干燥机中冷冻干燥，得到棒状支架材料；高温高压消毒后备用。