[发明专利]一种测定雪胆中3种活性成分的HPLC方法

说明书

本发明提供了一种测定雪胆中3种活性成分的HPLC方法，所述活性成分为雪胆甲素、雪胆乙素和齐墩果酸，包括如下操作步骤：a、取待检雪胆粉末，以乙醇提取，过滤，制备供试品溶液；b、取雪胆甲素、雪胆乙素、齐墩果酸对照品，混合，加乙醇溶解，制备对照品溶液；c、分别将供试品溶液、对照品溶液注入高效液相色谱仪检测；d、根据检测结果计算得到雪胆中的3种成分含量。本发明方法可以同时测定雪胆乙素、雪胆甲素和齐墩果酸这3种成分，方法高效准确且重现性良好，为雪胆的系统评价和质量控制提供依据，可更全面地保障雪胆药材的质量。

技术领域

本发明属于化学分析技术领域，具体涉及一种测定雪胆中3种活性成分的HPLC方法。

背景技术

雪胆属(Hemsleya)植物为葫芦科(Cucurbitaceae)多年生攀援草本植物，《中国植物志》记载该属植物共31种10变种，主要分布于我国西南至中南部地区，其中云南、贵州、四川三省份拥有全属植物的92％。该属多种植物的干燥块根可供药用，是我国西南地区各民族常用的中草药、民族药，具有清热解毒、抗菌消炎的功效，广泛用于治疗菌痢、溃疡病、肺炎、支气管炎、肠炎及其他多种感染，具有用量少、效果明显、无依赖性等优点，也被初步判断为可替代抗生素的药品。

雪胆属植物因产地、物种等因素的差异，致使其所含的化学成分和含量也不尽相同，不同的标准中所收载的雪胆属植物不尽相同，导致药材来源混乱，质量参差不齐。《新华本草纲要》收载的雪胆属植物有曲莲(H.amabilis)、雪胆(H.chinensis)和罗锅底(H.macrosperma)。《四川省中药材标准》收载的雪胆属植物有长果雪胆(H.dolichocarpa)、峨眉雪胆(H.omeiensis) 和巨花雪胆(H.gigantha)。《贵州省中药材、民族药材质量标准》(2003 年版)中收载的雪胆属植物有蛇莲(H.sphaerocarpa)和中华雪胆(H. chinensis)。目前主要从水分、总灰分和浸出物等方面评价雪胆药材的品质，该方法不能全面真实地体现被控药材的品质。

现代研究表明，雪胆属植物的主要活性成分为雪胆乙素、雪胆甲素和齐墩果酸等，然而，目前关于雪胆质量控制的报道多测定其中1类成分。例如何效平等，高效液相色谱法测定雪胆中雪胆甲素的含量，川北医学院学报， 2007，264-266，用HPLC方法只测定了雪胆块根中雪胆甲素的含量。

秦小东等,高效液相色谱-蒸发光散射法测定不同产地雪胆中齐墩果酸的含量，中国临床药理学杂志，2017,33,1582-1584，用HPLC方法只只测定了雪胆中齐墩果酸的含量。尚未见用高效液相色谱法同时测定雪胆中3种活性成分的报道。

发明内容

针对上述问题，本发明的目的是同时提供一种同时测定雪胆中三种活性成分的HPLC方法，以进一步完善雪胆的质量控制标准。

本发明提供了一种测定雪胆中3种活性成分的HPLC方法，所述活性成分为雪胆甲素、雪胆乙素和齐墩果酸，包括如下操作步骤：

a、取待检雪胆粉末，以乙醇提取，过滤，制备供试品溶液；

b、取雪胆甲素、雪胆乙素、齐墩果酸对照品，混合，加乙醇溶解，制备对照品溶液；

c、分别将供试品溶液、对照品溶液注入高效液相色谱仪检测，色谱条件如下：

色谱柱：C₁₈色谱柱；

流动相：流动相A为体积分数为0.1％的磷酸水溶液，B为乙腈，梯度洗脱程序为：

0～20min，5％～20％B；

20～60min，20％～30％B；

60～95min，30％～90％B；

95～100min，90％B；

检测波长：203nm；