[发明专利]一种朝鲜淫羊藿与粗毛淫羊藿的分子鉴定方法在审
| 申请号： | 201711054788.4 | 申请日： | 2017-11-01 |
| 公开（公告）号： | CN107604092A | 公开（公告）日： | 2018-01-19 |
| 发明（设计）人： | 庞晓慧;郭梦月;任莉;宋经元;陈士林 | 申请（专利权）人： | 中国医学科学院药用植物研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/6895 | 分类号： | C12Q1/6895 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 100193 北京市海*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 朝鲜 淫羊藿 分子 鉴定 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种用于朝鲜淫羊藿与粗毛淫羊藿的分子鉴定方法，包括PCR扩增叶绿体psbA-trnH序列。
2.根据权利要求1所述的方法，包括以下步骤：
1)提取样品DNA；
2)PCR扩增叶绿体psbA-trnH序列的片段；
3)对扩增产物进行拼接，获得叶绿体psbA-trnH序列；
4)基于K2P模型，构建测序拼接后的psbA-trnH序列的系统发育树。
3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述样品为朝鲜淫羊藿与粗毛淫羊藿。
4.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述PCR扩增的引物为：
正向引物PA：5′-GTTATGCATGAACGTAATGCTC-3′；
反向引物TH：5′-CGCGCATGGTGGATTCACAATCC-3′。
5.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述PCR扩增的体系为每25μL：2×Taq PCR Mix 12.5μL，2.5μmol/L引物各1μL，DNA模板2μL(约30ng)，ddH2O 8.5μL。
6.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述PCR扩增的条件为94℃变性1min，55℃退火1min，72℃延伸1.5min，30个循环。
7.权利要求1-6任一项所述方法在鉴别朝鲜淫羊藿与粗毛淫羊藿的应用。
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