[发明专利]一种他克林-芥子酸杂合体的制备方法及用途

说明书

本发明公开了一种他克林‑芥子酸杂合体、含他克林‑芥子酸杂合体的药用组合物、制备方法及用途。所述的他克林‑芥子酸杂合体具有下述结构：实验证明：本发明的他克林‑芥子酸杂合体对乙酰胆碱酯酶(AChE)和丁酰胆碱酯酶(BuChE)具有很强的抑制活性，抑制乙酰胆碱酯酶的能力是他克林的15倍，对淀粉样蛋白(Aβ)自聚集具有较强的抑制作用，还具有明显的抗氧化活性，没有明显的体外神经细胞毒性和体内急性肝毒性，并显示出显著地体外神经细胞保护活性，可以用于阿尔茨海默症的治疗。

技术领域

本发明属于有机合成和药物领域，具体涉及一种用于治疗阿尔茨海默病的他克林- 芥子酸杂合体、含他克林-芥子酸杂合体的药用组合物、制备方法及用途，特别是涉及通过将氨基他克林与芥子酸反应来制备他克林-芥子酸杂合体，以及此他克林-芥子酸杂合体在制备抗阿尔兹海默药物中的应用。

背景技术

他克林是首个被FDA批准用于治疗阿尔兹海默症(AD)的药物，属于第一代乙酰胆碱酯酶抑制剂。然而由于严重的肝毒性，限制了其临床应用。研究证实他克林的肝毒性与其游离的伯氨基密切相关，目前的研究多采用不同的功能的分子片段与他克林缀合，一方面屏蔽其游离的伯氨基，降低整个分子的肝毒性，另一方面可以增加新的功能，使整个分子具有多功能、多靶点作用的特色^[1-2]。

Fang等^[3-4]报道了他克林-阿魏酸杂合体(Ⅰ)，同时具有乙酰胆碱酯酶抑制活性和抗氧化活性，其乙酰胆碱酯酶抑制活性是他克林的近10倍。Chao等^[5]报道了他克林-咖啡酸杂合体(Ⅱ)具有乙酰胆碱酯酶抑制活性，其乙酰胆碱酯酶抑制活性是他克林的近3倍，以及抑制淀粉样蛋白Aβ聚集和神经保护活性。Xie等^[6]报道了他克林-维生素E杂合体(Ⅲ)，其乙酰胆碱酯酶抑制活性是他克林的近11倍，化合物(Ⅲ)在12.5μM没有明显的神经细胞毒性(PC12)，且急性肝毒性明显降低。Chen等^[7]合成了水飞蓟宾-他克林杂合体(Ⅳ)，其抑制乙酰胆碱酯酶的能力是他克林的0.29倍，但整个分子较他克林毒性明显降低。化合物在 50μM没有明显的神经细胞毒性(HT22)，并表现出一定的神经细胞保护作用；此外，其肝毒性也明显降低。

上述结果表明，抗氧化剂修饰他克林具有较好的效果。中药活性成分芥子酸具有抗氧化、抗炎、抗血小板聚集、神经保护等多种药理活性，我们采用芥子酸修饰他克林，取得了较上述报道更为理想的效果，主要体现在乙酰胆碱酯酶抑制活性，淀粉样蛋白自聚集抑制活性，抗氧化，神经保护以及肝毒性等方面(注：由于不同文献报道的方法具有差异，为消除系统误差，进行科学的比较，我们利用与他克林活性的倍率作为参数，进行比较研究)。我们研究发现，芥子酸与他克林的轭联物即本专利中的目标化合物，较阿魏酸-他克林(10 倍于他克林)，或咖啡酸-他克林(3倍于他克林)，具有更为优越的乙酰胆碱酯酶抑制活性，以及抑制淀粉样蛋白Aβ聚集和神经保护活性：1)本申请的目标产物对乙酰胆碱酯酶的抑制活性是他克林的15倍；2)目标产物在实验浓度(1.25-10uM)范围内对神经细胞PC12不仅无毒性，还有一定的促进生长作用：在浓度为10μM时，细胞存活率达到130％，而且对CoCl₂损伤PC12细胞具有显著的保护作用，该神经保护活性呈明显的剂量依赖性(74.5％，92.4％，99.5％和106.8％)，随着浓度的增加，其细胞存活率显著增加。3)本发明的他克林-芥子酸杂合体具有抑制Aβ42蛋白自聚集活性。在0.0064-100μM浓度区间内，随着他克林-芥子酸杂合体浓度的增加，Aβ42蛋白自聚集抑制率也相应升高，量效关系呈S型曲线，是典型的酶 --底物作用方式，显著优于对照药物他克林。4)肝药酶研究(ALT/AST)揭示其肝毒性也大大缓解，接近于空白对照组。因而，本发明的他克林-芥子酸杂合体是一种高效、低毒的治疗阿尔兹海默症的药物分子。

参考文献