[发明专利]改善质谱检测糖基结晶的方法及产品在审
申请号: | 201711054357.8 | 申请日: | 2017-10-31 |
公开(公告)号: | CN107884467A | 公开(公告)日: | 2018-04-06 |
发明(设计)人: | 马庆伟;梁飞;黄亚娟;丁欢;付书辉;梁坤 | 申请(专利权)人: | 北京毅新博创生物科技有限公司 |
主分类号: | G01N27/62 | 分类号: | G01N27/62;H01J49/40 |
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地址: | 102206 北京市昌平区*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 改善 检测 结晶 方法 产品 | ||
1.一种改善质谱检测糖基样本的结晶的方法,步骤包括:
(1)采用去离子水与高效液相色谱级的乙腈按照1:1的体积比混合,加入体积分数为0.1%的三氟乙酸溶液,得到混合溶液;
(2)称取50mg DHB基质(2,5-二羟基苯甲酸)用混合溶液充分溶解,DHB基质浓度为50mg/mL;
(3)取DHB基质和柠檬酸二胺溶液,按照9:1体积比混合均匀,即得基质溶液。
(4)选取0.5μL-1μL基质溶液和0.5μL-1μL样本,在芯片上进行点样结晶。
2.权利要求1的方法,其中步骤2中加入50mg的DHB,并且通过2000-3000rpm震荡3-10min,8000-12000rpm离心3-10min,得到DHB溶液。
3.权利要求1的方法,其中步骤4中选取0.5μL样本和0.75μL样本进行结晶。
4.权利要求3的方法,其中上述操作选自操作间十万级洁净度,环境温度20-25℃,环境湿度20-30%条件下进行。
5.权利要求1-4的方法中所用的能够提高质谱检测糖基靶分子的准确率的质谱芯片,该芯片包括:由硅材料或玻璃或钛合金组成的芯片主体,其表面具有多个竖直交叉排列的亲水区域定位孔、疏水孔外区域、中心校正孔、验证校正孔、备用校正孔;
其中,定位孔具有亲水特性,用于滴定基质溶液或样本;疏水孔外区域,表面具有疏水特性;定位孔和孔外区域形成的微阵列芯片表面亲疏水间隔的结构,可以辅助液体样本收缩凝聚在亲水区域内,使样本结晶集中,且呈现标准圆形,提高离子化效率;
中心校正孔和验证校正孔,用于校正蛋白标准的滴定位置验证校正孔,用来验证校正效果;
备用校正孔,作为备用,中心校正孔或验证校正孔如果出现异常,可用备用校正孔。
6.权利要求5的芯片其中定位孔在芯片上为(4-8)×(4-8)的竖直交叉方向排列,中心校正孔、验证校正孔以及备用校正孔在芯片中间位置竖向排列,数量均为1或2个。
7.权利要求6的芯片,其中所述芯片亲水性定位孔覆盖150-800nm的亲水性薄膜,疏水性孔外区覆盖150nm-2μm疏水性薄膜,其表面水滴接触角>120°。
8.权利要求7的芯片,其中所述亲水性薄膜为二氧化硅氧化物薄膜、氧化锌薄膜、氧化铝薄膜等,疏水性孔外区通过硅烷偶联剂进行处理形成疏水性薄膜。
9.权利要求10的芯片,其中所述硅烷偶联剂选自乙烯基硅烷、氨基硅烷或二甲基二氯硅烷。
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