[发明专利]用热激蛋白Hsp70基因检测昆虫寿命的方法及应用有效

专利信息
申请号: 201711054232.5 申请日: 2017-10-31
公开(公告)号: CN107641658B 公开(公告)日: 2020-04-07
发明(设计)人: 王孟卿;王娟;刘晨曦;张礼生;郭义;唐艺婷;陈红印 申请(专利权)人: 中国农业科学院植物保护研究所
主分类号: C12Q1/6888 分类号: C12Q1/6888;C12Q1/686;C07K14/435;C12N15/12
代理公司: 北京中创阳光知识产权代理有限责任公司 11003 代理人: 傅尚新
地址: 100193 *** 国省代码: 北京;11
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摘要:
搜索关键词: 用热激 蛋白 hsp70 基因 检测 昆虫 寿命 方法 应用
【权利要求书】:

1.检测热激蛋白Hsp70编码基因表达量在检测大草蛉寿命中的应用;所述热激蛋白Hsp70的核苷酸序列为序列表中的序列1。

2.根据权利要求1所述的应用,其特征在于:所述热激蛋白Hsp70基因编码的蛋白质的氨基酸序列为序列表中序列2,或序列表中序列1自5’末端第1-1632位核苷酸编码的544个氨基酸序列。

3.根据权利要求1或2所述的应用,其特征在于:用于检测热激蛋白Hsp70编码基因表达量的物质为如下1)-3)中任意一种:

1)引物对A由引物1和引物2组成,所述引物1的核苷酸序列为序列表中序列3;所述引物2的核苷酸序列为序列表中序列4;

2)引物对A由引物1和引物2组成,所述引物1的核苷酸序列为序列表中序列3;所述引物2的核苷酸序列为序列表中序列4;含有所述引物对A的qRT-PCR反应体系;

3)引物对A由引物1和引物2组成,所述引物1的核苷酸序列为序列表中序列3;所述引物2的核苷酸序列为序列表中序列4;含有所述引物对A或包含引物对A的qRT-PCR反应体系所有试剂的试剂盒。

4.根据权利要求3所述的应用,其特征在于:所述qRT-PCR反应体系的试剂由qRT-PCR扩增缓冲液Mix体系、dNTP、cDNA、由所述引物1作为的上游引物、由所述引物2作为的下游引物、去离子水、荧光染料组成;

所述上游引物、所述下游引物在所述qRT-PCR反应体系中的终浓度均为8-10μM。

5.根据权利要求4所述的应用,其特征在于:所述反应体系还包括内参引物对B,所述内参引物对B由引物3和引物4组成;

所述引物3的核苷酸序列为序列表中序列6;

所述引物4核苷酸序列为序列表中序列7。

6.一种用于检测热激蛋白Hsp70编码基因表达量的qRT-PCR反应体系,其特征在于:上述qRT-PCR反应体系的试剂由引物对A、qRT-PCR扩增缓冲液Mix体系、dNTP、cDNA、去离子水、荧光染料组成;

所述引物对A由引物1和引物2组成,所述引物1的核苷酸序列为序列表中序列3;所述引物2的核苷酸序列为序列表中序列4;

所述引物1作为所述qRT-PCR反应体系中的上游引物,所述引物2作为所述qRT-PCR反应体系中的下游引物;

所述上游引物、所述下游引物在所述qRT-PCR反应体系中的终浓度均为8-10μM。

7.根据权利要求6所述的qRT-PCR反应体系,其特征在于:所述反应体系还包括内参引物对B,所述内参引物对B由引物3和引物4组成;

所述引物3的核苷酸序列为序列表中序列6;

所述引物4核苷酸序列为序列表中序列7。

8.一种用于检测热激蛋白Hsp70编码基因表达量的试剂盒,其特征在于:包括引物对A或包含qRT-PCR反应体系所有试剂;所述引物对A由引物1和引物2组成,所述引物1的核苷酸序列为序列表中序列3;所述引物2的核苷酸序列为序列表中序列4。

9.根据权利要求8所述的试剂盒,其特征在于:所述qRT-PCR反应体系的试剂由引物对A、qRT-PCR扩增缓冲液Mix体系、dNTP、cDNA、去离子水、荧光染料组成;

所述引物对A由引物1和引物2组成,所述引物1的核苷酸序列为序列表中序列3;所述引物2的核苷酸序列为序列表中序列4;

所述引物1作为上游引物、由所述引物2作为下游引物,所述上游引物、所述下游引物在所述qRT-PCR反应体系中的终浓度均为8-10μM。

10.根据权利要求9所述的试剂盒,其特征在于:所述qRT-PCR反应体系还包括内参引物对B,所述内参引物对B由引物3和引物4组成;所述引物3的核苷酸序列为序列表中序列6;所述引物4核苷酸序列为序列表中序列7。

11.一种热激蛋白编码基因,其特征在于:

所述蛋白的编码蛋白质的核苷酸序列为序列表中序列1;

所述蛋白的编码蛋白质的氨基酸序列为序列表中的序列2。

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