[发明专利]一种L-乳酸催化反应体系及L-乳酸的制备方法

权利要求书

1.一种L-乳酸催化反应体系，其特征在于：含有葡萄糖脱氢酶、二羟酸脱水酶、2-酮-3-脱氧葡萄糖酸醛缩酶、甘油醛脱氢酶和L-乳酸脱氢酶,所述葡萄糖脱氢酶来源于Sulfolobus solfataricus，基因在NCBI上的编号为AJ012093，二羟酸脱水酶来源于Sulfolobus solfataricus，基因在NCBI上的编号为CP011057，2-酮-3-脱氧葡萄糖酸醛缩酶来源于Sulfolobus acidocaldarius，基因在NCBI上的编号为CP006977，甘油醛脱氢酶来源于Thermoplasma acidophilum，基因在NCBI上的编号为TA_RS04170，L-乳酸脱氢酶来源于Thermotoga maritima ,基因在NCBI上的编号为TM1687，其中，每1 mL反应体系中酶的添加量为：1 U/mL 的葡萄糖脱氢酶，2 U/mL的二羟酸脱水酶，1 U/mL的2-酮-3-脱氧葡萄糖酸醛缩酶，1 U/mL的甘油醛脱氢酶，1 U/mL的L-乳酸脱氢酶。

2.一种L-乳酸的制备方法，其特征在于：利用权利要求1所述反应体系的5个酶，以葡萄糖为原料，在一个反应器中进行级联酶促催化反应得到L-乳酸，具体反应过程为：

由葡萄糖脱氢酶催化葡萄糖生成葡萄糖酸；

由二羟酸脱水酶催化葡萄糖酸生成2-酮-3-脱氧葡萄糖酸；

由2-酮-3-脱氧葡萄糖酸醛缩酶将2-酮-3-脱氧葡萄糖酸转化为甘油醛和丙酮酸；

由甘油醛脱氢酶催化甘油醛生成甘油酸；

由二羟酸脱水酶催化甘油酸生成丙酮酸；

再由L-乳酸脱氢酶催化丙酮酸生成L-乳酸；

所述反应体系还含有以下各成分：辅酶NAD⁺，HEPES缓冲液和二价镁离子，所述HEPES缓冲液浓度为50-400 mM，pH值7.0；二价镁离子浓度为5 mM。