[发明专利]一种土鳖虫多糖的提取方法

说明书

本发明公开了一种土鳖虫多糖的提取方法，其具体步骤为：将土鳖虫粉碎成粗粉，超声波脱脂，过滤，滤渣烘干、粉碎制成脱脂土鳖虫粉；将脱脂土鳖虫粉浸泡于水中，超声微波萃取仪处理，离心，将上清液浓缩，透析，乙醇沉淀，离心，采用反复冻融法和Sevage法去除蛋白，上清液透析，浓缩，冷冻干燥，即得土鳖虫多糖；将NKA‑9大孔吸附树脂装入层析柱处理土鳖虫多糖溶液，收集洗脱液，浓缩，干燥，即得土鳖虫多糖。本发明提取方法简单可行，提取速率快，多糖的提取率和纯度较高，可降低水和溶剂用量，能保存多糖原有的结构与活性，减少能源消耗，更适合工业化生产的发展方向。

技术领域

本发明涉及天然产物深加工技术领域，特别涉及一种土鳖虫多糖的提取方法。

背景技术

土鳖虫又名地鳖、土别虫，是鳖蠊科昆虫地鳖(Eupolyphaga sinesis Walker)或冀地鳖(Eupolyphaga sinesis(Boleny))的雌虫干燥体，主产福建、河北、广西、广东、山东等地，性寒味咸，通心肝脾，是传统的活血化瘀类中药。明代李时珍的《本草纲目》中就有关于其药用的记载，它是传统的活血化瘀类昆虫药，有调整脂质代谢、抗脂质过氧化反应、保护内皮细胞作用。土鳖虫含有多种微量元素、脂肪酸类、氨基酸、多肽或蛋白质、糖类、生物碱、有机酸盐、甾体化合物等，在众多成分中，中药多糖具有免疫调节，抗肿瘤，抗氧化，降血糖，抗黏附，抗衰老，抗突变，肾脏保护，肝脏保护，防辐射，抗病毒，抗疲劳等药理作用。其中抗肿瘤和免疫调节活性较为突出。故近年来，中药多糖的研究十分活跃。与植物多糖相比，由动物体内提取的多糖，与人体细胞有更好的生物兼容性；同时由于单糖残基种类多，导致连接位置和糖苷键变化更多，因此结构更为复杂，活性可能更突出，近年来受到越来越多的关注。组成动物多糖的单糖残基不仅有植物来源多糖常见的葡萄糖、半乳糖、果糖等，更连接有己糖醛酸基、酰基和氨基，具有更为广泛的生物活性。遗憾的是，目前国内外多糖的研究多集中在植物与菌类，而对于动物多糖的研究相对较少。

现有技术如授权公告号为CN 103819575 B的中国发明专利，公开了一种土鳖虫多糖的提取方法、提取的多糖以及该多糖的用途，步骤如下：（1）脱脂：将干燥土鳖虫雌体粉碎，过筛，加入溶剂脱脂，回流，抽滤，滤渣挥干溶剂待用；（2）超声处理；（3）酶处理：调整pH，然后用复合酶水解，然后升温至85℃灭酶，抽滤，收集滤液，浓缩，得到浓缩提取液；（4）醇沉：将步骤（3）所得浓缩提取液加入乙醇，放置24小时析出土鳖虫粗多糖沉淀，抽滤，用95wt%乙醇和丙酮洗涤两次，50-70℃真空干燥，得到土鳖虫多糖。该提取方法具有提取条件温和、提取率高、成本低廉、操作简单、环境友好等优点。但是该提取方法得到的多糖纯度不够，含有杂蛋白和小分子物质。

发明内容

本发明的目的在于提供一种提取方法简单可行，资源利用率高，提取速率快，提取率高，多糖的提取效率高、纯度高，脱脂彻底的一种土鳖虫多糖的提取方法。

本发明针对上述技术中提到的问题，采取的技术方案为：

一种土鳖虫多糖的提取方法，包括脱脂、超声波-微波提取、脱色，其具体步骤为：