[发明专利]一种MA104细胞制备人用轮状病毒活疫苗的冻干工艺方法

权利要求书

1.一种MA104细胞制备人用轮状病毒活疫苗的冻干工艺方法，其特征在于：

所述的工艺步骤为：

1）未经纯化的轮状病毒疫苗原液与赋形剂、保护剂混合后制成半成品，开始预冻；

2）将预罐装有半成品的西林瓶，规格为0.5ml/支，放置于冻干机的搁板之上，选择有代表性的西林瓶，放入温度探头及共晶点检测探头，进行预冻：以2℃/min的速度，使用12.5min的时长从25℃降温至0℃，并维持60min；以1℃/min的速度，使用10min的时长从0℃降温至-20℃，并维持60min；以1℃/min的速度，使用10min的时长从-20℃降温至-40℃，并维持120min；

3）使用30min的时长将冻干机内的真空度降至0.1mbar，实际真空度维持在0.15mbar～0.2mbar之间；

4）真空度恒定后，搁板分四个阶段升温分别为-40℃升温至-35℃，-35℃升温至-25℃，-25℃升温至-15℃，-15℃升温至-5℃；

5）进一步抽真空，使用30min的时长将冻干机内的真空度由0.1mbar降至0.01mbar，同时搁板由-5℃升温至5℃；

6）随后60min内将温度升至15℃～25℃之间，维持200min～400min，真空状态下压盖出仓后得到最终制品，外观、溶解时间、水分、滴度均达到要求。

2.根据权利要求1所述的一种MA104细胞制备人用轮状病毒活疫苗的冻干工艺方法，其特征在于：所述的赋形剂不含明胶，质量百分比浓度为：6%～8%的甘露醇，1%～3%的右旋糖酐。

3.根据权利要求1所述的一种MA104细胞制备人用轮状病毒活疫苗的冻干工艺方法，其特征在于：所述的保护剂的质量百分比浓度为：2%～3%的谷氨酸钠，2%～3.5%的组氨酸及0.01%～1%的人血白蛋白。

4.根据权利要求1所述的一种MA104细胞制备人用轮状病毒活疫苗的冻干工艺方法，其特征在于:所述的赋形剂、保护剂根据要求的浓度，分别计算并称取制成母液所需的甘露醇，右旋糖酐，谷氨酸钠，组氨酸，溶解于一定体积的注射用水中，其中甘露醇和右旋糖酐需37℃温水浴，待完全溶解并冷却至室温定容后，0.22µm微孔滤膜过滤除菌制成母液。

5.根据权利要求1所述的一种MA104细胞制备人用轮状病毒活疫苗的冻干工艺方法，其特征在于:所述的保护剂人血白蛋白根据需要浓度直接加至病毒原液中。

6.根据权利要求1所述的一种MA104细胞制备人用轮状病毒活疫苗的冻干工艺方法，其特征在于:所述的最终制品外观为疏松体；水分含量为1.50%（质量百分比）；溶解时间为12s，无塌陷、萎缩及挂壁现象。