[发明专利]诱导小叶龙竹试管内形成花芽的方法

说明书

提供一种诱导小叶龙竹试管内形成花芽的方法，随机选取小叶龙竹无菌丛生营养芽接种于花芽诱导培养基上，每21天继代一次，经过3次连续的花芽诱导培养和1次恢复培养，在第85天左右有花芽出现。本发明的小叶龙竹试管花芽诱导方法操作简单、耗时短、诱导效率高、重复性好，将为深入研究木本竹类植物开花预测及花期调控提供研究材料，进一步为降低经营竹林的经济损失提供科学指导。

技术领域：

本发明属于生物技术领域，具体地，涉及一种诱导小叶龙竹试管内形成花芽的方法。

背景技术：

小叶龙竹(Dendrocalamus barbatus Hsueh et D.Z.Li)隶属于禾本科竹亚科牡竹属，为大型合轴丛生竹，主要分布在云南南部、越南、缅甸和老挝北部的热带和南亚热带地区。小叶龙竹是一种优良的竹类纤维原料，已成为最具发展前景的经济竹种之一。然而，小叶龙竹开花后竹秆便枯死，即使成片竹林中个别竹丛开花也会在几年内引起整片竹林开花死亡，这给经营者造成巨大损失。由于竹子大面积开花并没有明显征兆，且开花死亡后自然更新需要8-10年，给竹林产业的从业者造成困扰。

竹子试管开花实验体系的建立将对于了解竹子在开花前后的生理代谢和基因表达的差异提供简便可控的实验平台，从而为有效预测开花时间提供可能，降低经营竹林的经济损失。

迄今，现有技术中未见有成功建立一种操作简便、耗时短、诱导效率高、重复性好的诱导小叶龙竹试管内形成花芽的报道。

发明内容：

本发明旨在发明一种诱导小叶龙竹试管内形成花芽的方法，该方法操作简单、耗时短、诱导效率高、重复性好，在3个月内就可经由小叶龙竹的无菌丛生营养芽诱导获得花芽。

为了实现本发明的上述目的，本发明提供了如下的技术方案：

取小叶龙竹无菌试管丛生营养芽为外植体，每瓶接5块丛芽(3-5芽/丛)进行离体培养，培养温度为23±2℃，光照强度40μmol/m²·s，光照时间12h/d。基本培养基为MS，PH值为5.8，添加蔗糖3％，加5.6g/L琼脂固化，21天为继代周期。先在MS+TDZ 1.0mg/L培养基中连续培养3次，再转入培养基MS+BA 2.0+NAA 0.2培养1次，培养80-90天至花芽长出。

与现有技术相比，本发明具备如下的优益性：

本发明的优益性在于：随机选取小叶龙竹无菌丛生营养芽接种于花芽诱导培养基上，每21天继代一次，经过3次连续的花芽诱导培养和1次恢复培养，在第85天左右既有花芽出现。本发明建立的小叶龙竹试管花芽诱导方法操作简单、耗时短、诱导效率高、重复性好，将为深入研究木本竹类植物开花预测及花期调控提供研究材料，进一步为降低经营竹林的经济损失提供科学指导。

附图说明

图1为d组实验处理继代过程中丛芽的生长情况；

图2A为花芽，B为解剖花芽得到的雌蕊和雄蕊。

具体实施方式：

下面用本发明的实施例来进一步说明本发明的实质性内容，但并不以此来限定本发明。

实施例1：

1.无菌无性系的建立：