[发明专利]一种外源物质导入鸡胚的方法在审
| 申请号： | 201711031012.0 | 申请日： | 2017-10-30 |
| 公开（公告）号： | CN107723313A | 公开（公告）日： | 2018-02-23 |
| 发明（设计）人： | 李碧春;靳锴;左其生;张亚妮 | 申请（专利权）人： | 扬州大学 |
| 主分类号： | C12N15/89 | 分类号： | C12N15/89 |
| 代理公司： | 扬州苏中专利事务所(普通合伙)32222 | 代理人： | 许必元 |
| 地址： | 225009 *** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 物质 导入 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种外源物质导入鸡胚的方法，其特征在于：包括如下步骤：
（1）对孵育48-58h的13-17 HH早期胚蛋在无菌条件下开口，找到胚胎位置，剥去胚蛋外壳膜，露出胚胎血管；
（2）将需要导入的外源物质注入到玻璃注射针中，通过显微注射仪注射到鸡胚血管中；
（3）注射后加入青链霉素至注射部位，然后使用医用胶带封口。
2.根据权利要求1所述的一种新的外源物质导入鸡胚的方法，其特征在于：所述早期胚蛋在无菌条件下开口使用镊子在钝端开口，使用眼科镊剥去外壳膜。
3.根据权利要求1或2所述的一种外源物质导入鸡胚的方法，其特征在于：所述早期胚蛋开口大小为直径1-1.5cm的圆孔。
4.根据权利要求3所述的一种外源物质导入鸡胚的方法，其特征在于：所述玻璃注射针外径为1mm，内径为0.6mm。
5.根据权利要求4所述的一种外源物质导入鸡胚的方法，其特征在于：所述青链霉素的加入量是200ul。
6.根据权利要求5所述的一种外源物质导入鸡胚的方法，其特征在于：所述外源物质为脂质体包裹好的质粒pEGFP-N1进行注射，脂质体和质粒的质量体积比为1：3，将包裹好的质粒放在37度孵化箱中孵育30mins，然后使用微量移液器填入到所述玻璃注射针中，注射剂量为1-3ul。
7.根据权利要求6所述的一种外源物质导入鸡胚的方法，其特征在于：所述微量移液器移液范围为0.5-10ul。
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