[发明专利]一种同时检测水产品中64种兽药残留的方法

权利要求书

1.一种检测水产品中64种残留药物的方法，其特征在于：它包括如下步骤：

（1）取待检样品，前处理，制备得到供试液；所述前处理的步骤如下：

1）在待测物中加入乙腈-水，超声提取，加入无水硫酸钠除水；所述乙腈-水的体积比为80：20；

2）除水后浓缩近干，加入0.1%甲酸的甲醇-乙腈-水复容，加入乙腈饱和正己烷溶液净化，涡旋，超声；所述甲醇-乙腈-水的体积比为2：2：6；

3）取步骤2）得到的溶液的下层液，加入乙二胺-N-丙基硅烷净化，冷冻后离心，过有机相滤膜，得到供试液；

（2）采用超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱检测：

其中的色谱条件为：色谱柱：Accucore RP-MS柱；柱温：25-35℃；流速：0.25-0.35 mL/min；流动相：A相-含0.1%甲酸的水溶液，B相-含0.1%甲酸的乙腈溶液；梯度洗脱程序：0~15min，95% A；15~17 min，5% A；17~17.1 min，95% A；17.1~20 min，95% A；

其中的质谱条件为：离子源：可加热电喷雾离子源；采集方式：全扫描/数据依赖二级扫描；归一化碰撞能：20%、40%、60%；喷雾电压：3000~3500V离子传输管温度：300~400℃；加热器温度：300~450℃；鞘气N₂流速：35~50Arb；辅助气N2流速：5~20Arb；

所述的药物为非甾体类抗炎药、四环素类、喹噁啉及其代谢物、甲状腺拮抗剂、硝基呋喃类、苯并咪唑类、β₂-受体激动剂、镇静剂、磺胺类、喹诺酮类、氨苯砜、甾体类抗炎药、大环内酯类、硝基咪唑类。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于：所述的药物为4-硝基咪唑、羟甲基甲硝咪唑、5-氯-1-甲基-4-硝基咪唑、2-疏基苯并咪唑、苯基硫氧嘧啶、N-乙酰氨苯砜、磺胺喹噁啉、吲哚美辛、甲基硫脲嘧啶、甲硝唑、洛硝哒唑、克仑塞罗、卡巴氧、2-喹喔啉羧酸、呋喃唑酮、氨苯砜、羟基甲硝唑、呋喃它酮、丙基硫氧嘧啶、土霉素、磺胺二甲嘧啶、磺胺甲噻二唑、磺胺氯哒嗪、维吉霉素M1、二甲硝咪唑、阿苯达唑-2-氨基砜、替硝唑、磺胺甲氧哒嗪、磺胺间甲氧嘧啶、脱氧卡巴氧、氟甲喹、托麦汀、利托君、磺胺甲基嘧啶、呋喃西林、溴代克伦特罗、磺胺甲恶唑、噁喹酸、舒林酸、保泰松、特硝唑、4-甲酰氨基安替比林、诺氟沙星、羟基异丙硝唑、克仑潘特、阿苯达唑砜、群勃龙、酮洛芬、4-甲氨基安替比林、克仑丙罗、阿苯达唑亚砜、妥布特罗、奥芬达唑、芬苯达唑砜、吡罗昔康、去氢睾酮、阿扎哌醇、4-差向土霉素、美托洛尔、2-氨基-5-苯并咪唑、奥苯达唑、异丙硝唑、苯乙醇A、美洛昔康。

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于：其中的色谱条件为：色谱柱：Accucore RP-MS柱-100mm×2.1 mm，2.6 μm；柱温：30 ℃；流速：0.3 mL/min；进样量：10 μL。

4.如权利要求1所述的方法，其特征在于：其中的质谱条件为：离子源：可加热电喷雾离子源，采集方式：全扫描/数据依赖二级扫描；一级扫描分辨率为70000，二级扫描分辨率为17500；归一化碰撞能：20%、40%、60% ；喷雾电压：3200 V；离子传输管温度：325 ℃；加热器温度：350 ℃；鞘气N₂流速：40 Arb；辅助气N₂流速：10 Arb；动态排除：6 s；顶点触发：2~6s。

5.如权利要求1-4任意一项所述的方法，其特征在于：它还包括如下步骤：

取不同浓度的残留药物标准品，采用超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱检测；根据不同质量浓度的标准品对应质谱中的响应面积，建立标准曲线；根据待检样品相应物质在质谱中的响应面积，计算残留药物的含量。

6.如权利要求1-4任意一项所述的方法，其特征在于：取残留药物标准品，采用超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱检测；根据得到的残留药物标准品的质谱特性对待测样品中相应物质进行定性。