[发明专利]一种体外模拟微生物受胃、十二指肠环境胁迫的方法

权利要求书

1.一种体外模拟微生物受胃、十二指肠环境胁迫的方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)取仿生胃、肠道灭菌，并保持仿生胃、肠道的形态，并将整个仿生消化系统进行无菌处理；

(2)取配制的微生物菌液注入仿生胃中，在模拟胃环境下，与仿生胃消化液混合并进行消化；

(3)将经仿生胃消化后的微生物菌液注入仿生肠道中，在模拟十二指肠环境下，与仿生肠消化液混合并消化，并收集最终的微生物消化液，

另外，该方法还包括分别取仿生胃和/或仿生肠道中的消化液，进行微生物消化过程中各种性能检测的步骤，

其中，所述步骤(2)中，所述模拟胃环境的参数包括：保持胃部环境37℃，胃部运动的模拟蠕动参数为左侧15R/min、右侧15R/min，胃部挤压速度2mm/s、挤压位置30mm、幽门挤压速度2mm/s、挤压末端位置30mm、挤压张开位置15mm；若所述仿生胃消化液采用连续流加的形式，其流加速度为2mL/min；

所述仿生胃消化液配比包括：K⁺ 9.75mmol/L、Na⁺ 90.25mmol/L、Cl^- 67.63mmol/L、H₂PO₄^- 1.125mmol/L、CO₃^2- 25.5mmol/L、Mg²⁺ 0.15mmol/L、NH₄⁺ 1.25mmol/L、Ca²⁺0.15mmol/L、胃蛋白酶2000U/mL、调pH为1.5；

所述步骤(3)中，所述模拟十二指肠环境的参数包括：保持仿生肠道环境的温度为37℃，肠道运动的模拟蠕动参数为左侧15R/min、右侧15R/min；

所述仿生肠消化液配比包括：K⁺ 9.5mmol/L、Na⁺ 154.3mmol/L、Cl^- 56.5mmol/L、H₂PO₄^-1mmol/L、HCO₃^- 106.3mmol/L、Mg²⁺ 0.42mmol/L、Ca²⁺ 0.6mmol/L、胰液素100U/mL、胆盐10mM、调pH为7；

所述体外模拟微生物受胃、十二指肠环境胁迫的方法采用柔性人食管、胃、十二指肠和小肠一体化模型进行，该模型的制备方法包括如下步骤：

(S1)扫描人的食管、胃、十二指肠和小肠的内部和外部结构，制得仿生食管、仿生胃、仿生十二指肠和仿生小肠；

(S2)在模具上均匀涂抹脱模剂，将弹性液体材料浇注在模具上，待其固化后经脱模分别制得仿生食管、仿生胃、仿生十二指肠和仿生小肠；

(S3)在胃模型、十二指肠模型和小肠模型上分别打孔，在孔中插入并固定柔性管作为分泌管；

(S4)使用胶黏剂将仿生人的食管模型、胃模型、十二指肠模型和小肠模型按结构顺序利用硅胶粘结起来，即得一体化模型。

2.根据权利要求1所述的体外模拟微生物受胃、十二指肠环境胁迫的方法，其特征在于，所述仿生胃消化液与所述微生物菌液的体积比为1：1。

3.根据权利要求1所述的体外模拟微生物受胃、十二指肠环境胁迫的方法，其特征在于，所述仿生肠消化液与所述微生物菌液的体积比为1：1。

4.根据权利要求1所述的体外模拟微生物受胃、十二指肠环境胁迫的方法，其特征在于，所述步骤(1)中，所述仿生胃、肠道灭菌步骤为将所述仿生胃、肠道于121℃下高压灭菌处理15分钟后，置于50℃烘箱烘干内部水分；所述仿生消化系统无菌处理步骤为将消化系统设备整体用75％的酒精消毒处理。

5.根据权利要求1所述的体外模拟微生物受胃、十二指肠环境胁迫的方法，其特征在于，(S2)中，将制得的仿生食管、仿生胃、仿生十二指肠和仿生小肠经表面清洁后进行晾干处理。