[发明专利]一种同时测定玄参中哈巴苷、哈巴俄苷和肉桂酸的方法

权利要求书

1.一种同时测定玄参中哈巴苷、哈巴俄苷和肉桂酸的方法，其特征在于，采用如下步骤：将玄参药材粉末过三号筛，精密称定0.5 重量份，置具塞锥形瓶中，精密加入80％甲醇20 体积份，密塞，称定重量，浸泡1小时，超声处理60分钟，放冷，再称定重量，用80％甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，得到供试品溶液；精密称取经五氧化二磷干燥10 h的哈巴俄苷苷对照品、肉桂酸对照品及哈巴苷对照品适量，分别加30％甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品储备液，分别精密吸取哈巴俄苷、哈巴苷及肉桂酸对照品储备液适量，加30％甲醇制成每1mL分别含哈巴苷、肉桂酸、哈巴俄苷58.2、4.098、9.6 μg的混合对照品溶液，得到对照品溶液；使用ODS-AQ色谱柱，以0.1％磷酸水溶液-乙腈为流动相进行梯度洗脱，流速0.8-1.2 mL/min，柱温25-35℃，检测波长210 nm；然后根据肉桂酸与玄参药材粉末、哈巴俄苷与玄参药材粉末以及哈巴苷与玄参药材粉末各自的线性关系计算玄参粉末中的肉桂酸、哈巴俄苷、哈巴苷的含量。

2.如权利要求1所述的同时测定玄参中哈巴苷、哈巴俄苷和肉桂酸的方法，其特征在于：使用ODS-AQ色谱柱，以0.1％磷酸水溶液为A流动相，乙腈为B流动相，进行梯度洗脱，流速0.8mL/min，柱温35℃，检测波长210 nm。

3.如权利要求1所述的同时测定玄参中哈巴苷、哈巴俄苷和肉桂酸的方法，其特征在于：以0.1％磷酸水溶液为A流动相，乙腈为B流动相，按照以下程序进行梯度洗脱： B流动相的梯度为0～10 min，3％； 10～20 min，3％ →22％；20～60 min，22％；60～ 70 min，22％→3％。

4.如权利要求1所述的同时测定玄参中哈巴苷、哈巴俄苷和肉桂酸的方法，其特征在于：检测的环境温度为20-25℃，空气湿度75-78%。

5.如权利要求1-4任一项所述同时测定玄参中哈巴苷、哈巴俄苷和肉桂酸的方法，其特征在于：玄参药材粉末为炮制的玄参饮片磨粉而成，炮制工艺为玄参药材除去残留根茎和杂质，加水喷润，防置19min，蒸置72min，冷至室温，切成1-2mm的薄片，于49℃鼓风干燥箱中干燥48h，既得。

6.一种玄参的炮制方法，包括炮制和检测步骤，其特征在于，采用如下步骤：

（1） 玄参的炮制：玄参药材出去残留根茎和杂质，加水喷润，防置19min，蒸置72min，冷至室温，切成1-2mm的薄片，于49℃鼓风干燥箱中干燥48h，得玄参饮片；

（2）将步骤（1）制得的玄参饮片磨成粉，过三号筛，精密称定0.5 g，置具塞锥形瓶中，精密加入80％甲醇20 mL，密塞，称定重量，浸泡1小时，超声处理60分钟，放冷，再称定重量，用80％甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，得到供试品溶液；精密称取经五氧化二磷干燥10 h的哈巴俄苷苷对照品、肉桂酸对照品及哈巴苷对照品适量，分别加30％甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品储备液，分别精密吸取哈巴俄苷、哈巴苷及肉桂酸对照品储备液适量，加30％甲醇制成每1mL分别含哈巴苷、肉桂酸、哈巴俄苷58.2、4.098、9.6 μg的混合对照品溶液，得到对照品溶液；使用ODS-AQ色谱柱，以0.1％磷酸水溶液为A流动相，乙腈为B流动相，按照以下程序进行梯度洗脱： B流动相的梯度为0～10 min，3％； 10～20 min，3％ →22％；20～60 min，22％；60～ 70 min，22％→3％，流速0.8 mL/min，柱温35℃，检测波长210 nm；按下式计算玄参粉末中的肉桂酸、哈巴俄苷、哈巴苷的含量：

肉桂酸 y_肉桂酸=6465700x_肉桂酸-4021.3；

哈巴俄苷 y_哈巴俄苷=1978700x_哈巴俄苷-4662.6；

哈巴苷 y_哈巴苷=393630x_哈巴苷-4165；

其中y_肉桂酸表示肉桂酸利用高效液相色谱仪进行检测出的峰面积，x_肉桂酸表示肉桂酸的进样质量； y_哈巴俄苷表示哈巴俄苷利用高效液相色谱仪进行检测出的峰面积，x_哈巴俄苷表示哈巴俄苷的进样质量；y_哈巴苷表示哈巴苷利用高效液相色谱仪进行检测出的峰面积，x_哈巴苷表示哈巴苷的进样质量。