[发明专利]一种鉴定易成花荔枝种质资源的方法在审
| 申请号： | 201711020932.2 | 申请日： | 2017-10-26 |
| 公开（公告）号： | CN107586875A | 公开（公告）日： | 2018-01-16 |
| 发明（设计）人： | 丁峰;张树伟;彭宏祥;陈厚彬 | 申请（专利权）人： | 广西壮族自治区农业科学院园艺研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/6895 | 分类号： | C12Q1/6895;C12N15/11 |
| 代理公司： | 北京中誉威圣知识产权代理有限公司11279 | 代理人： | 朱志宽 |
| 地址： | 530007 广西壮族*** | 国省代码： | 广西;45 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 鉴定 易成花 荔枝 种质 资源 方法 | ||
1.一种鉴定易成花荔枝种质资源的方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)收集不同荔枝种质资源，并提取它们的DNA；
(2)荔枝LcFT1基因启动子有两个类型，分别为“EFT”型和“DFT”型，且含有“EFT”型启动子的荔枝种质资源容易成花；
根据LcFT1基因“EFT”型启动子的特异性设计一对上下游引物EFT-F和EFT-R，PCR扩增的目的条带大小为262bp，其具有如Seq ID NO.5所示的序列，用于检测LcFT1基因“EFT”型启动子；
根据LcFT1基因“DFT”型启动子的特异性设计一对上下游引物DFT-F和DFT-R，PCR扩增的目的条带大小为202bp，其具有如Seq ID NO.6所示的序列，用于检测LcFT1基因“DFT”型启动子；
(3)PCR扩增检测：分别以待检测荔枝种质资源的DNA为模板进行PCR扩增，扩增的PCR产物经1.5％浓度的琼脂糖电泳检测；
(4)易成花荔枝种质资源的鉴定：如果通过引物EFT-F和EFT-R扩增到262bp大小的目的条带，通过引物DFT-F和DFT-R扩增不到202bp大小的目的条带，则表明待检测荔枝为纯合“EFT”型易成花荔枝种质资源；如果通过引物EFT-F和EFT-R扩增到262bp大小的目的条带，通过引物DFT-F和DFT-R扩增到202bp大小的目的条带，则表明待检测荔枝为杂合型易成花荔枝种质资源。
2.根据权利要求1所述的鉴定易成花荔枝种质资源的方法，其特征在于，步骤(2)中所述的引物EFT-F为Seq ID NO.1所示的序列，所述的引物EFT-R为Seq ID NO.2所示的序列，所述的引物DFT-F为Seq ID NO.3所示的序列，所述的引物DFT-R为Seq ID NO.4所示的序列。
3.根据权利要求1所述的鉴定易成花荔枝种质资源的方法，其特征在于，步骤(3)中所述的PCR扩增的反应体系具体组成如下：DNA模板1μL，2×Taq PCR MasterMix(TIANGEN)12.5μL，上下游引物各1μL，水9.5μL，共25μL。
4.根据权利要求3所述的鉴定易成花荔枝种质资源的方法，其特征在于，所述的上游引物为Seq ID NO.1或Seq ID NO.3所示的序列，所述的下游引物为Seq ID NO.2或Seq ID NO.4所示的序列。
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