[发明专利]用于从hPSC生成胰腺祖细胞和功能性β细胞的方法和组合物有效

申请号：	201711013526.3	申请日：	2013-04-30
公开（公告）号：	CN108004199B	公开（公告）日：	2022-03-18
发明（设计）人：	凯勒·G;诺斯特罗·M·C;霍尔特辛格尔·A;萨兰奇·F	申请（专利权）人：	大学健康网络
主分类号：	C12N5/071	分类号：	C12N5/071;C12N5/02;C12N5/073;C12Q1/02
代理公司：	北京瑞恒信达知识产权代理事务所(普通合伙) 11382	代理人：	曹津燕;张伟
地址：	加拿大***	国省代码：	暂无信息
权利要求书：	查看更多	说明书：	查看更多
摘要：
搜索关键词：	用于 hpsc 生成胰腺细胞功能方法组合
钻瓜网技术展会专利词库专利权人专利榜在售专利公布日期热门专利

【权利要求书】：

1.一种从内胚层细胞群产生NKX6-1+胰腺祖细胞的方法，所述方法包括使所述内胚层细胞群与至少一种EGF组分和至少一种烟酰胺组分的组合接触至少3天，以诱导所述内胚层细胞群的至少一部分分化为NKX6-1+胰腺祖细胞，并且富集或分离NKX6-1阳性细胞群，

其中所述EGF组分包含Betacellulin和/或其活性变体和/或活性片段；

其中所述烟酰胺组分包含烟酰胺、其盐、溶剂化物和缀合物；聚ADP-核糖合成酶抑制剂；和/或其两种或更多种的组合；

其中所述内胚层细胞群不是从人胚胎获得的；和

所述富集或分离步骤包括使所述细胞群与HPx表位检测抗体接触，和分离或部分地纯化与HPx1和/或HPx2结合的细胞亚群。

2.根据权利要求1所述的方法，其中，所述组合还包含至少一种Noggin组分，所述至少一种Noggin组分包含以下中的一种或多种：Noggin和/或其活性缀合物和/或活性片段；BMPR1A和/或其活性缀合物和/或活性片段；BMPR1B和/或其活性缀合物和/或活性片段；Dorsomorphin和/或其盐或溶剂化物；LDN 193189和/或其盐或溶剂化物；CHORDIN和/或其活性缀合物和/或活性片段；和/或其两种或更多种的任意组合。

3.根据权利要求2所述的方法，其中，所述Noggin组分为Noggin。

4.根据权利要求1所述的方法，其中，所述聚ADP-核糖合成酶抑制剂包含苯甲酰胺、3-氨基苯甲酰胺和/或其两种或更多种的组合。

5.根据权利要求1所述的方法，其中，所述烟酰胺组分为烟酰胺和/或其盐、溶剂化物和/或缀合物。

6.根据权利要求1至5中任一项所述的方法，还包含Exendin-4组分，所述Exendin-4组分包含以下中的一种或多种：Exendin-4和/或其活性缀合物和/或活性片段；GLP-1和/或其活性缀合物和/或活性片段；和/或其两种或更多种的任何组合。

7.根据权利要求6所述的方法，其中，所述Exendin-4组分为Exendin-4。

8.根据权利要求1至5中任一项所述的方法，其中，所述内胚层细胞群在基本上同时的处理中用所述组合组分处理至少3天、至少4天、至少5天、至少6天、至少7天、至少8天、至少9天、至少10天、至少11天、至少12天、至少13天、至少14天或至少15天。

9.根据权利要求1至5中任一项所述的方法，其中，所述内胚层细胞群分化成NKX6-1+胰腺祖细胞的部分为至少30%。

10.根据权利要求1至5中任一项所述的方法，其还包括将NKX6-1阳性胰腺祖细胞与CD34+内皮细胞共培养。

11.根据权利要求1至5中任一项所述的方法，其中，所述内胚层细胞群分化自多能干细胞（PSC）。

12.根据权利要求11所述的方法，其中，所述PSC为胚胎干细胞（ESC）或诱导性多能干细胞（iPSC）。

13.根据权利要求12所述的方法，其中，所述多能干细胞为人ESC（hESC）或人iPSC（hiPSC）。

14.根据权利要求1至5中任一项所述的方法，首先包括产生内胚层细胞群。